[發明專利]一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法

無效

• 申請號: 200810013109.3
• 申請日: 2008-09-04
• 公開（公告）號: CN101348811A
• 公開（公告）日: 2009-01-21
• 發明（設計）人: 蘆明春;康少華;劉英新;劉波;金鳳燮
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12N9/24
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司
• 代理人: 賈漢生

1.一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法，其特征在于包括以下工藝步驟：

(1)雞內金酶的制取：

(a)雞內金粉碎成小于20目的粒度；

(b)用磷酸或醋酸緩沖液在4～30℃浸提雞內金粉3～36h；雞內金粉與磷酸或醋酸緩沖液的質量比為1∶6～10；離心棄渣，得上清液；

(c)在上清液中添加硫酸銨至飽和或過飽和以沉淀雞內金酶蛋白；離心棄去清液，得到雞內金酶蛋白；

(d)用磷酸或醋酸緩沖溶液溶解雞內金酶蛋白，雞內金酶蛋白與磷酸或醋酸緩沖溶液的質量比為1∶3～5；透析除去硫酸銨，離心棄渣，即得雞內金酶液；

(2)大豆異黃酮苷元的制備：

(e)大豆異黃酮苷用磷酸或醋酸緩沖液配制成1～100g/L的工作液；

(f)將雞內金酶液和(e)的工作液按1∶0.5～5的體積比混勻后，于25～50℃進行12～30h酶解反應；

(g)酶解反應終止后，加入乙酸乙酯，酶解反應液與乙酸乙酯的體積比為1∶1～3，充分震蕩萃取，靜置分層，萃取2次，分別合并上層和下層，上層即為大豆異黃酮苷元乙酸乙酯溶液；

(h)將(g)中大豆異黃酮苷元溶液通過濃縮蒸發除去乙酸乙酯后，可得到轉化率60～97％相應大豆異黃酮的苷元；

所述磷酸或醋酸緩沖液濃度為0.2M/L，pH為3.0～7.0。

2.根據權利要求1一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法，其特征在于其中在(1)雞內金酶的制取的步驟(c)和(d)以如下步驟替代：(c)用95％的乙醇沉淀雞內金酶蛋白；乙醇用量為(b)步驟的上清液3～6倍；(d)步驟為用磷酸或醋酸緩沖溶液溶解雞內金酶蛋白，雞內金酶蛋白與磷酸或醋酸緩沖溶液的質量比為1∶3～5；即得雞內金酶解液。

3.根據權利要求1一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法，其特征在于其中在(d)的步驟中，透析用玻璃紙袋進行。

4.根據權利要求1一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法，其特征在于其中在(g)的步驟中，萃取后的下層用乙酸乙酯再萃取1～2次，合并上層即為大豆異黃酮苷元乙酸乙酯溶液，進行(h)濃縮。

5.根據權利要求1一種大豆異黃酮苷制備其苷元的方法，其特征在于：所述的大豆異黃酮苷為大豆苷、染料木苷及黃豆苷單體形式或大豆苷、染料木苷及黃豆苷的混合物形式。