[發明專利]一種液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法

無效

• 申請號: 200810011185.0
• 申請日: 2008-04-25
• 公開（公告）號: CN101565687A
• 公開（公告）日: 2009-10-28
• 發明（設計）人: 張惠文;阮曉東;羅永平;李旭;蘇振成
• 申請（專利權）人: 中國科學院沈陽應用生態研究所
• 主分類號: C12N3/00
• 分類號: C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司
• 代理人: 許宗富;周秀梅

1.一種液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：將活化后的小克銀漢霉的種子按質量百分比為10～30％接入到液體發酵培養基中在25～30℃下振動發酵2～3天，再將液體發酵培養基中培養好的小克銀漢霉菌絲體分離，小克銀漢霉菌絲體洗滌2～4次，而后將其粉碎，粉碎后的菌絲體與固體發酵培養基按重量比為1∶6～10混合，在30～35℃、濕度60～80％條件下進行固相發酵3～5天以產生孢子；?

所述液體發酵培養基的組成為馬鈴薯150～200克，葡萄糖或蔗糖15～20克，磷酸二氫鉀1～2克，硫酸鎂0.5～1克，酵母膏0～0.5g，蛋白胨0～0.5g，氯化鈉0～0.5g，水1000mL，pH6.0～7.5；固體發酵培養基的組成為紅薯粉10％～30％，玉米粉5％～20％，麩皮5％～10％，磷酸二氫鉀0.01％～0.2％，硫酸鎂0.01％～0.2％，水40％～60％。

2.按權利要求1所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：將小克銀漢霉活化采用PDA斜面培養基或玉米粉瓊脂斜面培養基進行活化，活化時間為5～7天；所述液體發酵振動發酵的速度為150～200r/min。?

3.按權利要求1所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：所述在將液體發酵培養基中培養好的小克銀漢霉菌絲體采用離心或過濾收集菌絲體，其離心速度為2000～3000轉/分，時間為10～20分鐘。?

4.按權利要求1所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：所述小克銀漢霉菌絲體用無菌水或無菌生理鹽水洗滌；所述小克銀漢霉菌絲體粉碎采用電磨機將菌絲體粉碎成長度在500um～800um。?

5.按權利要求1所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：所述粉碎好的菌絲體與固體發酵培養基混合后，攤開高度為1～3cm；所述固相發酵時培養基上覆蓋無菌濾紙或無菌玻璃紙。?

6.按權利要求5所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：所述無菌濾紙的厚度為0.20-2.30mm，含水量為10％～70％，無菌玻璃紙的厚度為0.03-0.60mm，含水量為10％～70％。?

7.按權利要求1所述的液固雙相發酵生產小克銀漢霉孢子的方法，其特征在于：所述液體發酵培養基起始pH為5.5～7.5。?