[發明專利]暗消藤抗肺癌活性提取物及其化合物的制備工藝

無效

• 申請號: 200810010690.3
• 申請日: 2008-03-18
• 公開（公告）號: CN101537027A
• 公開（公告）日: 2009-09-23
• 發明（設計）人: 殷軍;韓娜;李松波
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: A61K36/27
• 分類號: A61K36/27;A61P35/00;A61P11/00;C07J19/00;A61K125/00
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司
• 代理人: 李宇彤

1、暗消藤提取物，包括活性提取部位與活性成分，其特征在于：含有下列化合物中的一種或多種，acovenosigenin?A??3-O--digitoxopyranoside，digitoxigenin?gentiobioside，digitoxigenin3-O-[O-?-glucopyranosyl-(1→6)-O-?-glucopyranosyl-(1→4)-3-O-acetyl-?-digitoxopyranoside]，digitoxigenin?3-O-[O--glucopyranosyl-(1→6)-O-?-glucopyranosyl-(1→4)-O--digitoxopyranosyl-(1→4)-?-cymaropyranoside，periplogenin3-O-(4-O-?-glucopyranosyl-?-digitalopyranoside)，acovenosigenin?A，periplogenin?3-O-?-digitoxoside，periplocymarin，periplogenin，digitoxigenin，digitoxigenin?3-O-[O-?-D-glucopyranosyl-(1→6)-O-?-D-glucopyranosyl-(1→4)-O-?-D-digitoxopyranoside，digitoxigenin?sophoroside，echujin，periplogenin?glucoside，corchorusoside?C，sualpinoside。

2、暗消藤提取物，其特征在于：所述的暗消藤其植物來源為蘿藦科暗消藤Streptocaulon?juventas的干燥根。

3、一種如權利要求1所述的暗消藤提取物的制備工藝，其特征在于：通過制備方法一所得的暗消藤水或醇的簡單提取物通過大孔吸附樹脂柱或聚丙烯酰胺柱或硅膠柱或經過萃取，或上述步驟組合進行，得到的適應不同要求含量不同的總強心苷活性部位；

其制備方法如下：

一.暗消藤藥材的提取工藝

(1)暗消藤根粗粉，加X％醇回流提取，提取液減壓回收醇至無醇味，濃縮為密度0.80-1.10的濃縮液，得到溶液I備用；

(2)暗消藤根粗粉，加水回流提取，提取液減壓濃縮為密度0.80-1.10的濃縮液II，備用；

二.暗消藤中的活性部位的富集工藝

(1)將溶液I或溶液II上樣于事先處理好的HPD-100柱，用30％，60％，90％乙醇洗脫，得到的60％乙醇洗脫物；

(2)溶液I或溶液II上樣于事先處理好的聚丙烯酰胺柱，用10％乙醇，95％乙醇洗脫，得到的10％洗脫物；

(3)溶液I蒸干，用熱水溶解，分別用乙醚(或氯仿，二氯甲烷的弱極性溶劑)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液，溶液II同法操作制得的正丁醇部分，為暗消藤的活性部位；

(4)溶液I或溶液II蒸干，用有機溶劑溶解，上樣于硅膠柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3∶1洗脫，得到的洗脫物為暗消藤的活性部位。

4、根據權利要求3所述的暗消藤提取物的制備工藝，其特征在于：所述的富集工藝還可以為上述富集路線1-4之間的兩個或三個互相組合。

5、根據權利要求3或4所述的暗消藤提取物的制備方法，其特征在于：可以從活性部位中提取分離并鑒定出活性化合物，其制備方法如下：

將16克暗消藤60％乙醇部位，上樣于事先處理好的聚丙烯酰胺柱，用水-醇梯度洗脫得到的含0-10％醇洗脫物，蒸干后干燥，稱重為11g，有機溶劑溶解上樣，二氯甲烷-甲醇(25∶1-1∶5)，得到6個流份(Fr.1-Fr.6)，流份2、3、4、5、6經反復硅膠柱層析、反相薄層制備、大孔樹脂柱層析、重結晶分離得到單體化合物，并運用核磁共振，質譜，紅外，氣相手段，確定了結構、相對及絕對構型。

6、根據權利要求3所述的暗消藤提取物的制備工藝，其特征在于：X％是指醇濃度在1％-100％的醇性溶液，所述的醇指具有以下通式的飽和一元醇或不飽和一元醇：C_nH_2n+1OH或C_nH_2n-1OH(n＜5)；在混合洗脫劑中，醇所占的百分含量在1％-95％之間；所述的吸附樹脂為苯乙烯類、苯丙酸類、丙稀酰胺類或氧化氮類大孔樹脂中的一種或幾種。