[發明專利]具毒殺植物線蟲活力的鏈霉菌的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 200810010465.X
• 申請日: 2008-02-25
• 公開（公告）號: CN101225370A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發明（設計）人: 陳立杰;陳井生;段玉璽
• 申請（專利權）人: 沈陽農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P5/00;C12R1/61
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技術領域：

本發明屬于微生物農藥技術領域，具體涉及一種毒殺植物寄生線蟲的放線菌及其制備方法和應用。

背景技術：

植物寄生線蟲在世界上許多國家和地區發生和為害，種類多種多樣。在全球范圍內，植物寄生線蟲的發生與危害隨著農林業的發展和耕作栽培制度的變化日益嚴重，據Esser統計，到1990年為止全世界已報道發現植物寄生線蟲207屬4832種(劉維志，段玉璽.2000.植物病原線蟲學.北京：中國農業出版社，p1-2)。據估計，植物寄生線蟲造成世界主要農作物的年損失率為12.3％，超過1000億美元，而實際的損失遠遠超過估計，理由是許多線蟲造成的危害因沒有田間可見癥狀或專化性特征而未引起注意(王壽華.果樹線蟲學.北京：中國農業科技出版社，1994.P.1-5)，此外，世界范圍內對線蟲為害的新發現還在不斷增加，而且一些更新的農業栽培體制使線蟲問題更加突出，再者，線蟲與其它生物相互作用而對植物產生的直接或間接影響還在急劇增加。從這種意義上說，線蟲造成的危害較其它生物更加隱蔽！目前對植物有害的線蟲約有3000多種，在我國主要有根結線蟲、胞囊線蟲、松材線蟲、甘薯莖線蟲等。根結線蟲是農業上為害最大的一類線蟲，病害發生后，一般減產10％左右，嚴重的高達75％以上，甚至絕收(A.G.Whitehead，1998.Plant?Nematode?Control.ISBN0851991882?CAB?International)。目前，植物寄生線蟲的防治仍以化學防治為主，但近年來，化學殺線劑的應用浪費大，污染環境，選擇性差，滅生性強，破壞土壤生物區系等弊端日益為人們所重視(張克勤，何世川，周薇等.1991.真菌和細菌在線蟲生防中的作用及其研究進展.殺蟲微生物.3：55-66)，21世紀稱為環保世紀，一些有效的化學殺線劑的應用逐步受到限制，因此對植物寄生線蟲的生物防治研究自然成為熱點問題。

放線菌廣泛分布在土壤中的優勢微生物類群，是一類比其他微生物更為豐富的生物活性物質資源，大多數是離體腐生型微生物。在目前已經發現的數萬種微生物來源的生物活性物質中，約有70％是由放線菌所合成的各種次生代謝產物，其中僅聚酮類就有一萬種。放線菌中又以鏈霉菌產生的種類最多，占總數的52％。放線菌作為抗生素的重要產生菌，被用以篩選具有殺線蟲活性的菌株，目前國際上廣泛用于防治昆蟲、螨類和線蟲的阿維菌素(Avermectins)就是一種放線菌的代謝產物。Dicklow(1993)等從線蟲的抑制性土壤中分離得到菌株CR-43能抑制秀麗小桿線蟲(Caenorhabditis?elegans)的繁殖。溫室試驗表明：該菌對防治馬鈴薯和辣椒根部的南方根結線蟲(Meloidogyne?incognita)，草莓根部的短體線蟲(Pratylenchus?penetrans)，同時對草莓黑腐病具有較好的抑制作用。Jopseph(1995)鑒定CR-43是鏈霉菌的新種Streptomyces?costaricanus。Chubachi等將6株鏈霉菌其發酵液經丙酮萃取后，能抑制南方根結線蟲J2的活動性。在黃瓜溫室防效試驗中，6株菌均有利于根的伸長生長，增加根的鮮重；其中NA-494易于定殖，對黃瓜的防治效果顯著。Tian等(2001)報道了S.violaceusniger能防治大豆胞囊線蟲病和南方根結線蟲病；Annette試驗表明：S.lavendulaedui對南方根結線蟲有一定毒殺活性。Deborah(2000)等人報道：放線菌S93和S63的發酵液在接種6周后，能顯著減少紫花苜蓿抗病和感病品種根部短體線蟲(P.penetrans)的蟲口密度。Susan(2005)報道，鏈霉菌S99-60的發酵液在實驗室測定能減少哈密瓜根結線蟲卵孵化和J2的活動性。日本K.Otogur等人檢測已知的抗生素對擬松材線蟲(Bursaphelenchus?mucronatus)的毒殺活性篩選到IC50低于10μg/mL的8種化合物，它們是粘菌素A(Colistin?A)、多粘菌素B1(Polymyxin?B1)、短桿菌肽S(Gramicidin?S)、干蠕孢菌素(Siccanin)、星形孢菌素(Staurosporine)、世田霉素Setamycin)、抗霉素A(Antimycin?A)和阿維菌素(Avermectin?B1a)。抗霉素A9(Antimycin?A9)是日本北里研究所從放線菌的發酵液中分離得到甲基酯類化合物，是人們第一次發現含有8-酰基芳香族結構的抗生素，具有很強的開發利用價值。