[發(fā)明專利]多肽有機化合物及其在異種移植中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200810001314.8
• 申請日: 2006-03-31
• 公開（公告）號: CN101230095A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 詹金彪;郎建社;許林海;嚴志焜
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K38/08;A61P37/06
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術(shù)領(lǐng)域

本案為申請?zhí)?006100501640的分案申請,本發(fā)明屬有機化合物，主要涉及多肽類有機化合物，尤其是關(guān)于人工合成的多肽有機化合物及其在異種移植中的應(yīng)用。

技術(shù)背景

醫(yī)學技術(shù)的進步使人類同種器官移植成為了可能。由于人體器官的來源不足，大量的病人得不到急需的器官，利用豬的器官代替人體器官是目前研究的熱點。但由于豬的細胞表面存在異種抗原表位Gal-α-1，3-Gal能與人體內(nèi)預(yù)存的天然抗體結(jié)合產(chǎn)生超急性排斥反應(yīng)，從而導致異種器官移植的失敗。人們在努力尋找一種方法可以封閉或清除人天然抗α-Gal抗體，為異種器官移植開辟途徑。噬菌體展示技術(shù)是一種能夠篩選與靶分子結(jié)合的特異性多肽的有力工具，已成功運用于抗原表位，特異性受體激動劑或抑制劑和疫苗的研究。在本實驗中我們利用噬菌體展示技術(shù)，對兩種肽庫，線性7肽庫和C7C文庫，進行了親和篩選。線性7肽庫中展示的多肽沒有結(jié)構(gòu)限制，具有相對柔性的結(jié)構(gòu)。C7C肽庫展示的多肽由于有一對二硫鍵的限制而形成環(huán)狀，構(gòu)象相對穩(wěn)定。同時采用兩種肽庫進行篩選，目的在于比較由于結(jié)構(gòu)不同而造成的篩選出的多肽在氨基酸序列上的差異。由于抗B型血單克隆抗體有結(jié)合α-Gal抗原表位的特性，因此我們以抗B型血單克隆抗體為靶分子，篩選出能夠模擬α-Gal抗原表位的多肽，可以特異地阻斷天然抗α-Gal抗體，可以用于異種器官移植超急性排斥反應(yīng)。

目前臨床常用的免疫抑制劑有環(huán)孢素A、糖皮質(zhì)激素、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺等，可以降低整體的免疫反應(yīng)，但對異種器官移植超急性排斥反應(yīng)無效，并且有多種副作用，如常見的就有骨髓抑制、肝腎毒性、上消化道出血、脫發(fā)等等。我們篩選到的多肽化合物可以特異地阻斷異種器官移植超急性排斥反應(yīng)，但不影響人體的整體免疫反應(yīng)，可避免常用免疫抑制劑引起的副作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服目前臨床上異種器官移植術(shù)中出現(xiàn)的排斥反應(yīng)，設(shè)計并提供一種多肽有機化合物。

本發(fā)明提供的多肽有機化合物，選自a、b、c、d、e、f、g、h八種中的一種，能與抗B型血單克隆抗體特異性結(jié)合，溶于水，各氨基酸之間通過肽鍵相連。

本發(fā)明提供的多肽有機化合物a的氨基酸序列為：Phe-His-Glu-Asn-Trp-Pro-Ser，分子量為915.96；多肽有機化合物b的氨基酸序列為：Phe-His-Glu-Phe-Trp-Pro-Thr，分子量為963.06；多肽有機化合物c的氨基酸序列為：Ser-Met-Leu-Asp-Thr-Pro-Thr，分子量為763.86；多肽有機化合物d的氨基酸序列為：Cys-Leu-Pro-Thr-Ile-Thr-Asn-Thr-Cys，(其中第1位的Cys與第9位的Cys之間形成二硫鍵)，分子量為963.15；多肽有機化合物e的氨基酸序列為：Cys-His-Ile-Leu-Gly-Ser-Thr-Ala-Cys，(其中第1位的Cys與第9位的Cys之間形成二硫鍵)，分子量為902.07；多肽有機化合物f的氨基酸序列為：Cys-His-Pro-Thr-Trp-Ser-Ser-Leu-Cys，(其中第1位的Cys與第9位的Cys之間形成二硫鍵)，分子量為1031.18；多肽有機化合物g的氨基酸序列為：Cys-His-Gln-Thr-Pro-Leu-Ser-Thr-Cys，(其中第1位的Cys與第9位的Cys之間形成二硫鍵)，分子量為987.13；多肽有機化合物h的氨基酸序列為：Cys-Lys-Pro-Thr-Ser-Thr-Leu-Thr-Cys，(其中第1位的Cys與第9位的Cys之間形成二硫鍵)，分子量為951.14。

本發(fā)明的第二個目的是提供多肽有機化合物a、b、c、d、e、f、g、h在制備治療器官移植術(shù)中控制異種移植中超急性排斥反應(yīng)的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的優(yōu)點有：

①本發(fā)明的多肽有機化合物，由于分子組成只有7～9個氨基酸，故可以用人工化學合成方法大量合成，可以得到大量較純的小肽。

②能與人體內(nèi)預(yù)存的抗豬抗原的抗體特異性結(jié)合，從而封閉它的作用，可以抑制豬器官移植至人體時發(fā)生的超急性排斥反應(yīng)。

③本發(fā)明的多肽有機化合物與人體內(nèi)預(yù)存的天然抗α-Gal抗體的結(jié)合位點是特異性的，正好起到封閉抗體作用，從而避免了由于作用位點特異性不強而帶來的副作用。

④由于本發(fā)明的多肽有機化合物的組成氨基酸數(shù)量較少，開發(fā)成藥物后容易被機體利用而起效。

附圖說明

圖1為三種線性多肽與水蘇糖競爭性與抗B單克隆抗體結(jié)合的ELISA抑制率曲線圖。