[發明專利]由代謝工程化酵母進行的丁醇生產

無效

• 申請號: 200780051627.8
• 申請日: 2007-12-21
• 公開（公告）號: CN101652482A
• 公開（公告）日: 2010-02-17
• 發明（設計）人: 尤維尼·古納沃德納;彼得·邁因霍爾德;馬修·W·彼得斯;瓊·尤拉諾;里德·M·R·費爾德曼
• 申請（專利權）人: 格沃股份有限公司
• 主分類號: C12P7/16
• 分類號: C12P7/16
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 岑曉東

1.一種代謝工程化酵母，其能夠代謝碳源以生成正丁醇，至少一種途 徑配置成生成相對于野生型酵母所生成的另一胞質乙酰-CoA量增加的胞質 乙酰-CoA量，且至少一種異源基因編碼并表達能夠利用NADH來將乙酰 -CoA轉化成正丁醇的代謝途徑的至少一種酶。

2.權利要求1的酵母，其中所述至少一種異源基因單獨地編碼并表達 能夠利用NADH來將乙酰-CoA轉化成正丁醇的代謝途徑的至少一種酶。

3.權利要求1的酵母，其中所述至少一種異源基因與至少一種天然酵 母基因組合地編碼并表達能夠利用NADH來將乙酰-CoA轉化成正丁醇的代 謝途徑的至少一種酶。

4.權利要求1的酵母，其中所述酵母過表達丙酮酸脫羧酶以提高胞質 乙酰-CoA生成。

5.權利要求4的酵母，其中所述丙酮酸脫羧酶是由釀酒酵母基因PDC1 所編碼的。

6.權利要求4的酵母，其中所述丙酮酸脫羧酶是由釀酒酵母基因 PDC1、PDC5、和PDC6中至少一種所編碼的。

7.權利要求1的酵母，其中所述酵母過表達醛脫氫酶以提高胞質乙酰 -CoA生成。

8.權利要求7的酵母，其中所述醛脫氫酶是由釀酒酵母基因ALD6所編 碼的。

9.權利要求7的酵母，其中所述醛脫氫酶是由乳酸克魯維酵母基因 ALD6所編碼的。

10.權利要求1的酵母，其中所述酵母過表達乙酰-CoA合成酶以提高胞 質乙酰-CoA生成。

11.權利要求10的酵母，其中所述乙酰-CoA合成酶是由釀酒酵母基因 ACS1和釀酒酵母基因ACS2中至少一種所編碼的。

12.權利要求10的酵母，其中所述乙酰-CoA合成酶是由乳酸克魯維酵母 基因ACS1和乳酸克魯維酵母基因ACS2中至少一種所編碼的。

13.權利要求1的酵母，其中所述酵母過表達醛脫氫酶和乙酰-CoA合成 酶二者以提高胞質乙酰-CoA生成。

14.權利要求13的酵母，其中所述醛脫氫酶是由釀酒酵母基因ALD6所 編碼的，且所述乙酰-CoA合成酶是由釀酒酵母基因ACS1和釀酒酵母基因 ACS2中至少一種所編碼的。

15.權利要求13的酵母，其中所述醛脫氫酶是由乳酸克魯維酵母基因 ALD6所編碼的，且所述乙酰-CoA合成酶是由乳酸克魯維酵母基因ACS1和乳 酸克魯維酵母基因ACS2中至少一種所編碼的。

16.權利要求13的酵母，其中所述酵母過表達丙酮酸脫羧酶以提高胞質 乙酰-CoA生成。

17.權利要求16的酵母，其中所述丙酮酸脫羧酶是由PDC1、PDC5和 PDC6中至少一種所編碼的，醛脫氫酶是由釀酒酵母基因ALD6所編碼的，且 所述乙酰-CoA合成酶是由釀酒酵母基因ACS1和釀酒酵母基因ACS2中至少一 種所編碼的。

18.權利要求16的酵母，其中所述丙酮酸脫羧酶是由乳酸克魯維酵母基 因PDC1所編碼的，醛脫氫酶是由乳酸克魯維酵母基因ALD6所編碼的，且所 述乙酰-CoA合成酶是由乳酸克魯維酵母基因ACS1和乳酸克魯維酵母基因 ACS2中至少一種所編碼的。

19.權利要求1的酵母，其中所述酵母過表達丙酮酸脫氫酶以提高胞質 乙酰-CoA生成。

20.權利要求19的酵母，其中所述酵母過表達由大腸桿菌基因aceE、 aceF、lpdA所編碼的丙酮酸脫氫酶以提高胞質乙酰-CoA生成。

21.權利要求20的酵母，其中PDC活性是降低的和消除的之一。

22.權利要求19的酵母，其中所述酵母過表達由刪除了N-末端線粒體靶 向信號的釀酒酵母基因PDA1、PDB1、PDX1、LAT1、LPD1所編碼的丙酮酸 脫氫酶以提高胞質乙酰-CoA生成。