[實用新型]萊克多巴胺ELISA檢測試劑盒

在審

• 申請號: 200720127296.9
• 申請日: 2007-08-02
• 公開（公告）號: CN201130185Y
• 公開（公告）日: 2008-10-08
• 發明（設計）人: 沈建忠;何方洋;萬宇平;馮才偉;朱亮;吳小平;趙正苗;劉平;劉福林;陳煒玲;羅曉琴
• 申請（專利權）人: 北京望爾生物技術有限公司;北京望爾康泰生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/78;G01N33/545;G01N33/549
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

(一)技術領域：

本實用新型涉及動物源性食品中藥物殘留量的檢測試劑盒，特別是檢測動物源性食品中萊克多巴胺殘留量的試劑盒。

(二)背景技術：

萊克多巴胺(Ractopamine)是一種苯乙醇胺類藥物。用于畜牧漁業，它是一種“營養再分配劑”，屬于β-興奮劑，萊克多巴胺作為“瘦肉精”的替代品，效果好、經濟回報高、使用普遍；用于醫藥，它是一種強心藥，可用于治療肥胖癥和肌肉萎縮癥。但人累計攝入劑量超過一定值，或食用萊克多巴胺高殘留的內臟組織時，出現中毒反映，癥狀表現為骨骼肌肉收縮增加，破壞快縮肌纖維與慢縮肌纖維之間的融合，引發肌肉震顫，四肢和面部的肌肉尤為明顯，其它中毒癥狀包括心動過速、心率失常、腹痛、肌肉疼痛、惡心和暈眩等，因此我國禁止使用，我國農業部第176號公告規定萊克多巴胺為禁止在飼料和動物飲用水中使用的藥物。因此，檢測萊克多巴胺在動物性食品種的殘留量是非常必要的。

目前，常用于萊克多巴胺殘留檢測的方法主要有微生物法和儀器分析法。微生物檢測法雖然經濟、操作簡便，但在樣本中有其他微生物抑制劑存在時，其靈敏度和特異性受到限制；高效液相色譜分析法、氣譜、氣質聯機法等單純的儀器分析方法，雖然靈敏度高，但樣本前處理及測定操作煩瑣，費用高，不適宜于大量樣本的篩查。

(三)實用新型內容：本實用新型所要解決的問題是提供一種小巧輕便的萊克多巴胺殘留檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準確、靈敏度高，成本低，穩定性好，需要的技術含量不高，可進行一次連續多個樣品中萊克多巴胺含量的測定，減少了檢驗樣本所需要的時間。

本實用新型的技術方案是：采用96孔聚苯乙烯試劑板作為固相載體，放入真空鋁鉑袋中，在試劑盒酶標板微孔條上預包被萊克多巴胺偶聯抗原制成檢測板，以塑料硬膜為蓋板膜，將40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復溶液、12ml酶標二抗、0.8ml萊克多巴胺抗體濃縮液、7ml顯色液A液、7ml顯色液B液、7ml瓶1ml高濃度標準品溶液，試劑用不同大小、不同顏色的塑料瓶和玻璃瓶盛裝并固定在泡沫塑料模具中與試劑板、蓋板膜一同封裝在盒內，以便于攜帶和運輸。每一個試劑盒中的試劑足夠進行96次測定(包括標準分析孔)，既可進行一次連續多個樣品的檢測，也可以將板孔拆開多次檢測。檢測時，樣本中的殘留物(萊克多巴胺)將和酶標板微孔條上預包被的偶聯萊克多巴胺抗原競爭抗萊克多巴胺抗體，加入酶標二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與樣本中所含殘留物(萊克多巴胺)的含量成負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中萊克多巴胺的殘留量，其操作簡便易行。

經實驗表明本試劑盒具有很高的靈敏度：肉樣品的最低檢測限為1μg/kg、肝樣品的最低檢測限為2μg/kg、尿液的最低檢測限為1μg/L、配合料的最低檢測限為25μg/kg、濃縮料/預混料的最低檢測限為75μg/kg；尿液的回收率為80％±10％、組織(肉/肝)的回收率為75％±10％、飼料的回收率為60±20％；同多巴酚丁胺的交叉反應率約為13％、同克倫特羅的交叉反應率為＜0.1％、同沙丁胺醇的交叉反應率為＜0.1％。相對于其他萊克多巴胺殘留檢測方法，本試劑盒所需儀器較少，只需要酶標儀、勻質器、振蕩機和微量加樣器，同類實驗室一般均有配備，所需成本較低。

本實驗新型的有益效果是：能快速、簡便、靈敏、準確地用于動物源性食品中萊克多巴胺殘留的檢測。

(四)附圖說明：

圖1為本實驗新型酶聯板的側面橫剖面圖(長為12.8cm)；

圖2為本實驗新型酶聯板的俯視圖；

圖3為本實驗新型酶聯板的側面縱剖面圖(長為8.55cm)；

圖4為本實驗新型蓋板膜平面圖；

圖5為本實驗新型試劑瓶縱剖面平面圖；

圖6為本實驗新型固定泡沫模具的俯視圖。