[發明專利]大黃素和大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷以及白藜蘆醇苷對照品的制備方法

無效

• 申請號: 200710307285.3
• 申請日: 2007-12-18
• 公開（公告）號: CN101462937A
• 公開（公告）日: 2009-06-24
• 發明（設計）人: 戚歡陽;師彥平
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘭州化學物理研究所
• 主分類號: C07C50/34
• 分類號: C07C50/34;C07C46/10;C07H15/244;C07H1/08;C07C39/21;C07C37/68;A61K36/704
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司
• 代理人: 方曉佳

技術領域

本發明涉及一種大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷對照品的同時制備方法。

背景技術

隨著中藥與天然藥物藥效物質基礎研究的不斷深入，對中藥或天然藥物中的活性單體的需求逐漸增大，制備大量的活性單體以供中藥或天然藥物質量標準研究和進一步的活性研究就顯得比較迫切。

大黃素和大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷為蒽醌類化合物具有明顯的抗菌、消炎等活性在中藥大黃和虎杖中的含量較高。白藜蘆醇苷屬于二苯乙烯類化合物，具有強心、抗腫瘤及抗氧化等活性，在虎杖中含量較高。這三種化合物在中國藥典中主要作為大黃和虎杖的質量控制指標。通常情況下大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷這三種對照品依據在不同植物中的含量高低分別由大黃和虎杖制備純化。本發明首次從次常用中藥毛脈蓼中同時制備得到三種對照品。

毛脈蓼Polygonum?cillinerve?Ohwi為蓼科蓼屬植物，其塊根除用作紅藥子(Radix?Polygoni?Ciliinerve)外，在西北地區還作朱砂七或朱砂蓮藥用，產陜西秦嶺和大巴山各縣，湖北、四川、貴州也有少量分布，一般均自產自銷。氣微、味苦、微澀、性涼，有清熱解毒、涼血止血、祛風濕、強腰膝等功能，用于胃腸炎、菌痢、扁桃體炎、月經不調、功能性子宮出血等。現代藥理學研究證實其具有較強的抗氧化、抗菌、抗病毒等活性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷對照品的同時制備方法。

本發明的發明思想是將粉碎后的毛脈蓼藥材加入溶劑提取，提取液過濾、減壓回收得到總提物，總提物加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部分經過兩步硅膠柱層析純化；柱層析洗脫液合并濃縮后，置于不同溶劑中重結晶，分別得到大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷三種對照品。

一種大黃素和大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷以及白藜蘆醇苷對照品的制備方法，其特征在于該方法依次包括如下步驟：

1)將粉碎后的毛脈蓼藥材中加入溶劑提取；

2)將毛脈蓼藥材提取液過濾、減壓回收得到總提物，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，減壓回收得石油醚部分和乙酸乙酯部分；

3)取乙酸乙酯萃取部分經過兩次柱層析純化；

4)合并不同配比的柱層析洗脫液，減壓濃縮后置于不同溶劑中重結晶，分別得到大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷三種對照品。

本發明更具體的制備方法依次包括如下步驟：

A、在粉碎后過20-80目篩的毛脈蓼藥材中加入60～98％的工業乙醇或甲醇，提取方法包括熱回流、超聲或微波提取，提取時間為30-180分鐘；

B、將毛脈蓼藥材提取液過濾、減壓回收得到總提物，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，減壓回收得石油醚部分和乙酸乙酯部分；

C、取乙酸乙酯萃取部分經過兩次硅膠柱層析純化，第一次柱層析采用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脫，第二次柱層析采用氯仿/甲醇等度洗脫；

D、收集合并不同配比的柱層析洗脫液，減壓濃縮后在氯仿/甲醇溶液或甲醇/水溶液中重結晶，分別得到大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷三種對照品。

在步驟A中，料液的體積比為1：1～1：10。

在步驟C中，第一次柱層析采用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脫，石油醚與乙酸乙酯的體積比為9：1～3：2。

在步驟C中，第二次柱層析采用氯仿/甲醇等度洗脫，氯仿與甲醇的體積比為5：1。

在步驟C中，柱層析填料為柱層析用硅膠。

在步驟D中，在氯仿與甲醇溶液的體積比為1：9～9：1。

在步驟D中，甲醇與水溶液的體積比為1：9～9：1。

本發明的優點在于：

1)同時從一種中藥中提取大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷三種對照品，因為在通常情況下大黃素、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷和白藜蘆醇苷三種對照品依據在不同植物中的含量高低分別從不同的藥材，如大黃和虎杖中提取分離純化。

2)通過石油醚萃取除去小極性雜質，使得乙酸乙酯萃取部分能夠同時富集兩種不同類型的化合物，即蒽醌和二苯乙烯類化合物。

3)經過兩次硅膠柱層析分離純化了包括苷元和苷在內的不同極性的三種對照品。

4)針對不同化合物的性質和特點，分別采用不同溶劑重結晶，從而得到高純度的單體，簡單、方便、消耗少，污染低。