[發(fā)明專利]檢測人血型的電化學方法及系統(tǒng)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710305362.1
• 申請日: 2007-12-28
• 公開（公告）號: CN101470120A
• 公開（公告）日: 2009-07-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 汪大明;楊文;肖江群;王保丹
• 申請（專利權(quán)）人: 英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80;G01N27/416
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測人類血型的方法及系統(tǒng)，特別是涉及使用電化學手段檢測人類ABO血型所使用的電化學檢測方法和系統(tǒng)。

發(fā)明背景

血液分型是將人血液分成A、B、AB和O四種不同類型的常規(guī)方法。目前，血液分型方法都是根據(jù)紅血細胞懸液的細胞聚集完成的。該方法是首先從病人血清中分離紅細胞。將適量的紅細胞與引入試管中或玻片上的試驗溶液(含有抗A血清、抗B血清)或其稀釋液混和，可以再加入利于免疫反應(yīng)進行的試劑并保溫、離心和攪拌。然后在顯微鏡下肉眼觀察，確定細胞是否發(fā)生了聚集。

如果樣品在抗A試劑存在下發(fā)生細胞聚集，而在抗B存在下不發(fā)生集聚即鑒定為A型血。樣品在抗B試劑存在下發(fā)生細胞聚集，但在抗A存在下不發(fā)生聚集則鑒定為B型血。樣品與抗A和抗B試劑均有聚集，樣品為AB型血。樣品與抗A和B血清均不發(fā)生反應(yīng)則定為O型血。

目前檢測ABO血型的技術(shù)可以分為兩類，一類為檢測細胞膜上結(jié)合血型抗原的技術(shù)，包括紅細胞鹽水凝集法、中和實驗、吸收實驗、解離實驗和混合凝集反應(yīng)等。另一類直接檢測游離血型抗原，包括協(xié)同凝集反應(yīng)、放射免疫反應(yīng)等。

紅細胞鹽水凝集法是通過已知的IgM型抗體結(jié)合新鮮紅細胞表面的血型抗原，導致紅細胞凝集，來判斷被檢血液的血型。此方法廣泛用于臨床輸血前的血型檢驗(配型)，但只能用于檢測新鮮紅細胞的血型，而且試劑均需低溫保存。

其他血型檢測方法也都存在各自的缺點，例如中和實驗費時較長，而且靈敏度比較低。解離實驗和混合凝集反應(yīng)操作要求高，每次實驗需要反復摸索條件，其靈敏度也不高；協(xié)同凝結(jié)反應(yīng)是用IgG型抗體致敏SPA蛋白，通過葡萄球菌的凝集是否判斷血型，但對試劑保存要求較高，使其應(yīng)用受到一定限制；放射免疫和酶聯(lián)免疫方法雖然靈敏度高，但是不適合單人份檢測，也無法實現(xiàn)現(xiàn)場檢測。

上述這些血型分析和判斷方法需要由有經(jīng)驗的技術(shù)人員手工完成的，所以常常受到技術(shù)人員經(jīng)驗和工作疲勞程度等因素影響，導致結(jié)果判斷錯誤。另外，傳統(tǒng)方法需要使用載玻片、蓋玻片和吸管等物件及抗人球蛋白抗體。如果使用不慎，在實驗過程中很可能對人員或環(huán)境造成嚴重污染。可見，目前常用的臨床血型鑒定方法存在檢定時間長、手工勞動強度大，以及結(jié)果受主觀偏差影響較大和存在污染的可能等問題。因此，有必要對傳統(tǒng)的血型檢測方法做出實質(zhì)性的改進。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了利用電化學阻抗分析技術(shù)檢測人ABO血型的檢測系統(tǒng)，該系統(tǒng)是以化學交聯(lián)法在電極表面固定的紅細胞ABO血型抗體，與待檢紅細胞發(fā)生免疫結(jié)合反應(yīng)，引起工作電極的交流阻抗的改變來達到對血型的鑒定，所說的檢測系統(tǒng)包括：(1)檢測電極：為絲網(wǎng)印刷的三電極，其中包括石墨工作電極、石墨對電極和銀/氯化銀參比電極，其中工作電極表面固定有ABO血型抗體；(2)交流阻抗分析裝置：為能夠檢測由于紅細胞與其抗體的結(jié)合所導致的工作電極交流阻抗的變化，從而借以判斷紅細胞表面抗原的類型。

根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案，其中所說的交流阻抗法血型檢測系統(tǒng)是利用電極表面固定的紅細胞ABO血型抗體與紅細胞發(fā)生免疫結(jié)合反應(yīng)，引起電極之間交流阻抗的改變來達到對血型的鑒定。

本發(fā)明的交流阻抗法血型檢測系統(tǒng)包括：(1)檢測電極：為絲網(wǎng)印刷的三電極。三電極包括石墨工作電極、石墨對電極和銀/氯化銀參比電極，其中工作電極表面固定有ABO血型抗體；(2)檢測裝置：為具有檢測交流阻抗功能的電化學分析裝置，在紅細胞與相應(yīng)抗體反應(yīng)后，其能夠檢測出由于特定血型紅細胞的存在所導致的工作電極交流阻抗的改變，從而可借以判斷紅細胞表面血型抗原的類型。

本發(fā)明是利用紅細胞與紅細胞ABO血型抗體發(fā)生免疫反應(yīng)前后電極表面顯著變化，導致的工作電極的交流阻抗發(fā)生變化的這一特性，達到對血型的指示。

根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，其特征在于所說的檢測電極是絲網(wǎng)印刷的三電極，其中包括石墨工作電極，銀/氯化銀參比電極以及石墨對電極。檢測時，該檢測電極被插入在檢測裝置前端的凹槽內(nèi)。

根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，特征是采用化學交聯(lián)法將抗A抗體或抗B抗體固定在工作電極表面，并使所說的抗體直接在電極表面上與待檢紅細胞發(fā)生免疫反應(yīng)。

根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，其特征是利用交流阻抗的電化學分析裝置直接測量絲網(wǎng)印刷電極的交流阻抗變化，并分析所說變化的幅度。