[發明專利]一種分離產阿魏酸酯酶微生物的方法

無效

• 申請號: 200710304761.6
• 申請日: 2007-12-29
• 公開（公告）號: CN101215525A
• 公開（公告）日: 2008-07-09
• 發明（設計）人: 楊紅建;岳群
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/16;C12R1/645
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 王朋飛

1.一種用于篩選產阿魏酸酯酶微生物的篩選培養基，其特征在于，所述培養基的碳源為阿魏酸乙酯。

2.根據權利要求1所述的篩選培養基，其特征在于，所述微生物為厭氧真菌。

3.根據權利要求1所述的篩選培養基，其特征在于，所述阿魏酸乙酯的終濃度為1-20μM。

4.根據權利要求3所述的培養基，其特征在于，所述篩選培養基為液體培養基時，阿魏酸乙酯的終濃度為2μM，所述篩選培養基為固體培養基時，阿魏酸乙酯的終濃度為9μM。

5.權利要求1～4任一項所述培養基在篩選分離產阿魏酸酯酶微生物中的應用。

6.一種分離產阿魏酸酯酶微生物的方法，其利用權利要求1所述的培養基培養樣品。

7.一種分離產阿魏酸酯酶厭氧真菌的方法，包括以下步驟：

1)取新鮮微生物樣品，接種于常規液體培養基中，梯度稀釋，39℃培養；

2)將存活于最高稀釋度培養基中的菌接種于常規液體培養基中進行傳代，39℃培養；

3)取此菌接種于液體篩選培養基中，39℃培養；

4)取此菌接種于固體篩選培養基中，于冰上滾管，39℃培養；

5)將單菌落接種于液體篩選培養基中，39℃培養；

6)重復步驟3)和4)，3～4次后，即可獲得單菌，

其中所述液體篩選培養基和固體篩選培養基均是以阿魏酸乙酯作為碳源的厭氧真菌培養基。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述步驟3)和5)中液體篩選培養基中阿魏酸乙酯的終濃度為：1-20μM；步驟4)中固體篩選培養基中阿魏酸乙酯的終濃度為：1-20μM；步驟1)、2)和3)中培養時間為3-10天；步驟4)中培養時間為1-3天；步驟5)中培養時間為2-5天。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述步驟3)和5)中液體篩選培養基中阿魏酸乙酯的終濃度2μM；步驟4)中固體篩選培養基中阿魏酸乙酯的終濃度為9μM。