[發明專利]一種兔抗人MK單克隆抗體及其雜交瘤細胞株和應用

無效

• 申請號: 200710301302.2
• 申請日: 2007-12-26
• 公開（公告）號: CN101255194A
• 公開（公告）日: 2008-09-03
• 發明（設計）人: 姚行;戴利成;錢福初
• 申請（專利權）人: 湖州市中心醫院
• 主分類號: C07K16/24
• 分類號: C07K16/24;C12N5/16
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司
• 代理人: 徐關壽

1、一種兔抗人MK單克隆抗體，由以下方法獲得：以GST-MK融合蛋白為抗原獲得的免疫后兔脾細胞，與兔骨髓瘤樣240E細胞進行細胞融合，選擇與GST-MK融合蛋白呈陽性反應、而與GST蛋白呈陰性反應的雜交瘤細胞，進行亞克隆并擴大培養，得到所述兔抗人MK單克隆抗體。

2、如權利要求1所述的兔抗人MK單克隆抗體，其特征在于所述GST-MK融合蛋白由如下方法制備得到：將MK的cDNA目的基因插入含有GST基因的質粒中、接在GST基因下游，得到重組質粒，重組質粒轉化大腸桿菌BL21，以含氨芐青霉素的培養基進行擴大培養，至OD600值達到0.3～0.6時加入異丙基硫代半乳糖苷誘導表達，得到表達GST-MK融合蛋白的菌體，再經PBS重懸、細胞破碎、離心，得到所述GST-MK融合蛋白。

3、如權利要求2所述的兔抗人MK單克隆抗體，其特征在于所述含有GST基因的質粒為pGEX-1λT。

4、一種產生如權利要求1所述兔抗人MK單克隆抗體的雜交瘤細胞株，由以下方法獲得：以GST-MK融合蛋白為抗原獲得的免疫后兔脾細胞，與兔骨髓瘤樣240E細胞進行細胞融合，選擇與GST-MK融合蛋白呈陽性反應、而與GST蛋白呈陰性反應的雜交瘤細胞，即為所述雜交瘤細胞株。

5、如權利要求1所述的兔抗人MK單克隆抗體在組織MK表達中的應用。

6、如權利要求1所述的兔抗人MK單克隆抗體在血清MK濃度檢測中的應用。