[發明專利]一種多肽及其應用

無效

• 申請號: 200710192344.7
• 申請日: 2007-12-25
• 公開（公告）號: CN101210044A
• 公開（公告）日: 2008-07-02
• 發明（設計）人: 王自正;俞楊;杜同信;瞿衛;立彥
• 申請（專利權）人: 王自正;俞楊;杜同信;瞿衛;立彥
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12N15/11;C12N15/63;A61K31/7088;A61K38/08;A61K48/00;A61P37/00;C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司
• 代理人: 徐冬濤;劉成群

技術領域

本發明屬于生物工程領域，涉及一種多肽及其應用。

背景技術

噬菌體展示技術是將高度多樣性的多肽或蛋白展示于噬菌體衣殼蛋白表面的一項技術。這一技術將展示分子的基因型和表型聯系在一起，極大地方便了多肽或蛋白分子的功能性篩選。通過“吸附-洗脫-擴增”的親和篩選過程，可以將文庫中的篩選所得分子進行多至10⁸的富集，而且由于文庫中多肽序列豐富的多樣性(＞10⁹)，這一篩選過程是高通量篩選，由此得到的具有高度特異性和極強親合力的多肽或蛋白在生物醫學的基礎研究和臨床診斷與治療的實踐中具有重要的應用價值。隨著噬菌體展示的不斷發展，近年來眾多的研究人員將其用于活體的體內篩選。

國內外研究資料表明體內篩選是噬菌體展示研究中的新興領域，具有更加重要的生物學意義：體外表達、純化所得的靶蛋白在空間結構和生物學功能上都可能與機體內的天然狀態具有很大的差異，體內篩選的策略更好地模擬在整體狀態下的多肽和血管表面分子之間的相互作用；體內篩選技術有可能發現新的靶器官血管表面表達分子，并借助特異性結合多肽客觀地評價器官血管表面的分子表達水平；在篩選過程中就施以體內的選擇壓力，從而為篩選出具有潛在的臨床價值的多肽配體奠定基礎，這種多肽配體可以作為示蹤劑和藥物的靶向性載體將核素、化療藥物或具有治療作用的基因片段轉運到病變局部，或本身就具有生物學效應而作為藥物有效地應用于臨床疾病的診斷和治療。

噬菌體展示隨機多肽文庫在靶向性小分子多肽的體內篩選方面體現出了重要的應用價值。與抗體藥物相比，多肽至少具有下列優點：1)與重組技術的產業化生產工藝相比，多肽篩選、合成與修飾的成本較底；2)以單位質量計算具有明顯的高生物學活性；3)在室溫下比抗體更穩定；4)不容易產生免疫排異，副作用小；5)具有很強的器官穿透性。

Pasqualini和Ruoslahti的研究小組對小鼠的肺、皮膚、胰腺、腸、子宮、腎上腺等組織進行了篩選，發現在這些臟器中均存在相應的血管內皮特異性分子的異質性表達，這就提示機體血管腔并不是一個表面分子分布均勻一致的管道，其表面分子的分布與血管所供應的臟器有很強的相關性。根據這個結果，研究人員提出了“血管密碼(VascularZip?Codes)”的概念，即某個個體中不同臟器的血管內皮具有不同的分子標志物。Pasqualini研究小組從遺傳性肥胖的小鼠體內篩選出了與白色脂肪組織的微血管內皮特異性結合的噬菌體多肽，利用相應的合成肽作為載體將誘導凋亡的藥物帶到局部血管可使其發生凋亡，白色脂肪組織明顯萎縮，肥胖小鼠的體重下降且未出現明顯的副作用。

體內篩選有效地模擬了正常的生物學狀態，對認識血管的分子表達譜具有重要的價值，而且其研究成果可以方便地過渡到臨床診斷或治療藥物的開發，因此，近年來這一領域進展迅速。

隨著免疫學研究的不斷深入，人們認識到胸腺在成年后依然具有生物學功能，在機體免疫中起重要作用。胸腺功能的異常與免疫缺陷、自身免疫性疾病、感染、腫瘤等有關。臨床上，某些胸腺相關疾病發生時常常引起胸腺T細胞輸出功能的異常增強，從而導致一系列的臨床表現(如胸腺瘤所致的重癥肌無力)。此類疾病可以考慮通過抑制胸腺輸出功能來改善全身的免疫狀態。T細胞受體重排切除環(TCR?rearrangement?excisioncircles，TRECs)是T細胞發育早期重排形成T細胞受體α基因時，存在于細胞染色體外的環形DNA切除產物，是初始T細胞的特異性標志。定量檢測外周血中的TRECs含量可以用來評價胸腺輸出功能，可用于多種疾病診療過程中機體自身免疫狀態的評估。

發明內容

本發明的目的是提供一種能夠與胸腺特異性結合的多肽、編碼該多肽的核苷酸序列及其表達載體。

本發明另一個目的是提供上述多肽、核苷酸序列及其表達載體的應用。

本發明的目的是通過下列技術措施實現的：

一種多肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示。

氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示的多肽的表達載體。所述的表達載體是質粒、噬菌粒、噬菌體、大腸桿菌。

編碼SEQ?ID?No.1的核苷酸序列。

含有編碼SEQ?ID?No.1的核苷酸序列的表達載體。所述的表達載體是質粒、噬菌粒、噬菌體、大腸桿菌。

所述的多肽在制備靶向作用于胸腺的藥物或診斷試劑中的應用。

所述的核苷酸在制備靶向作用于胸腺的藥物或診斷試劑中的應用。

所述的表達載體在靶向作用于胸腺的制備藥物或診斷試劑中的應用。