[發明專利]鋰診斷/測定試劑盒及鋰濃度測定方法

無效

• 申請號: 200710192110.2
• 申請日: 2007-12-19
• 公開（公告）號: CN101464317A
• 公開（公告）日: 2009-06-24
• 發明（設計）人: 王爾中
• 申請（專利權）人: 蘇州艾杰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N33/84;C12Q1/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種鋰診斷/測定試劑盒，同時本發明還涉及測定鋰濃度的方法，屬于醫學/工業/環境檢驗測定技術領域。

背景技術

20世紀40年代，Cade首次用鋰鹽治療躁狂癥成功，總有效率約70％，鋰鹽對躁狂和抑郁的復發有預防作用，也用于治療分裂情感性精神病。另外，鋰鹽可使雙相障礙維持治療階段的自殺行為減少86％，而當停用鋰鹽后，自殺危險性會增加7.5倍。當血鋰濃度達到或超過1.5mmol/L，會出現不同程度的中毒癥狀，血鋰濃度3.0mmol/L以上可危及生命。

近幾年，臨床實驗室多數方法學都有了新的發展，但鋰的測定方法基本維持：火焰原子發射法、火焰原子吸收法及離子選擇電極法。原子吸收的方法是將稀釋的標本吸入乙炔火焰中，利用空心陰極元素燈光源發出被測元素的特征輻射光，為火焰原子化器產生的樣品蒸汽中的待測元素基態原子所吸收。鋰在波長670.8nm處的被吸光的特征輻射光的大小與標本中的鋰濃度成正比。但目前國內的臨床實驗室沒有統一的實驗方法和實驗操作規程，也很難在精神病醫院的實驗室中查找到其使用情況。

自然界中無游離鋰，因此實際指鋰離子或鋰鹽，而碳酸鋰是最重要的鋰化物。碳酸鋰被用于陶瓷釉料的生產、特種玻璃、鋁的熔煉和鋼鐵鑄造粉末。氫氧化鋰和氯化鋰應用在潤滑劑、空調和干燥系統中。丁基鋰、鋰金屬、特種無機物和特種有機物，被用于制藥、合成橡膠等領域。鋰是一種稀有金屬，鋰電池就以它為主要原料，航空航天工業也離不開鋰。金屬鋰與鋰合金在核能發電、輕質高比強合金、輕金屬焊接等諸多領域都有著廣闊的開發利用前景。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：提出一種利用酶比色法(EnzymaticColorimetric?Method)及酶(偶)聯法(Couple?Reaction)技術，監測還原型煙酰胺輔酶(還原型輔酶)在340nm波長處吸光度的變化，得以測定鋰濃度的方法，同時，本發明還將給出用以實現該方法的鋰診斷/測定試劑盒，采用該試劑不僅可以在紫外/可見光分析儀或半、全自動生化分析儀上進行鋰濃度測定，而且測定速度快、準確度高，因而可以得到切實的推廣應用。

本發明鋰濃度測定方法原理如下：

肌醇-1-磷酸+水??肌醇-1-磷酸酶/Mg²⁺/Li⁺??肌醇+磷酸根

磷酸根+谷氨酰胺+腺苷二磷酸??谷氨酰胺合成酶??氨+

??????????????????????????????谷氨酸+腺苷三磷酸

谷氨酸+水+輔酶??谷氨酸脫氫酶??氨離子+2-酮戊二酸酯

??????????????????????????????????????+還原型輔酶

這種方法應用能被鋰抑制活性的肌醇-1-磷酸酶(inositol-1-phosphase；EC3.1.3.25)酶(偶)聯谷氨酰胺合成酶(glutamine?synthetase；EC6.3.1.2)、谷氨酸脫氫酶(Glutamate?dehydrogenase；EC1.4.1.2；EC1.4.1.3)酶促反應連續監測法/速率比色法。肌醇-1-磷酸酶(需要鎂離子激活其活性，鋰離子能抑制鎂離子的激活作用)酶解肌醇-1-磷酸反應產生磷酸根，再通過(偶)聯合谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脫氫酶的作用，最終將輔酶(在340nm處沒有吸收峰)還原成為還原型輔酶(在340nm處有吸收峰)，從而得以測定還原型輔酶在340nm處吸光度上升的程度/速度，比較對照及鋰樣品吸光度上升的程度/速度的差別，可以測算鋰的濃度大小。

實驗表明，從測定結果的準確性和配制成本的經濟性兩方面綜合考慮，無論是單劑、雙劑還是三劑，如下成分關系的本發明鋰診斷/測定試劑盒較為理想：

緩沖液??????????????????????100mmol/L

穩定劑??????????????????????500mmol/L

輔酶????????????????????????3mmol/L

氯化鎂??????????????????????0.6mmol/L

肌醇-1-磷酸酶???????????????10000U/L