[發明專利]微生物轉化D－果糖制備D－阿洛酮糖的菌種和方法

有效

• 申請號: 200710191380.1
• 申請日: 2007-12-12
• 公開（公告）號: CN101177672A
• 公開（公告）日: 2008-05-14
• 發明（設計）人: 江波;沐萬孟;張龍濤
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/02;C12R1/01
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一株轉化D-果糖制備D-阿洛酮糖的菌種，其分類命名為球形紅桿菌(Rhodobacter?sphaeroides)SK011，保藏編號為CCTCC?NO：M?207185。

2.用權利要求1所述球形紅桿菌(Rhodobacter?sphaeroides)SK011菌株轉化D-果糖制備D-阿洛酮糖的方法，其特征是

A、菌株的培養：

(1)出發菌株：球形紅桿菌(Rhodobacter?sphaeroides)SK011；

(2)保藏培養基：葡萄糖營養瓊脂培養基；

(3)種子培養基：葡萄糖1-10g/L，玉米漿10-100g/L，尿素1-20g/L，K₂HPO₄·3H₂O?0.1-5g/L，KH₂PO₄?0.1-5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1-5g/L，pH?7.0，去離子水配制；

種子培養條件：用250mL三角瓶裝25-70mL種子培養基，按常規方法滅菌、冷卻、接種后于30-45℃，150-250r/min搖床培養12-24h作種子培養液；

(4)發酵培養基組成：玉米漿10-100g/L，尿素1-5g/L，K₂HPO₄·3H₂O?0.1-5g/L，KH₂PO₄?0.1-5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1-5g/L，pH?7.0，去離子水配制；

發酵條件：用250mL三角瓶裝25-70mL培養基，按常規方法滅菌、冷卻、接種后于30-45℃，150-250r/min搖床培養12-24h后添加1.5g/L的D-塔格糖作為誘導物繼續培養12-24h；

B、生物轉化：

(1)將培養所得到的發酵液進一步處理得到的濕菌體、凍干菌粉、透性化細胞或固定化細胞作為細胞生物催化劑；

(2)將D-果糖按0.1％-75％的比例配制成水溶液作為生物轉化底物反應液；

(3)將細胞生物催化劑，加入底物反應液進行轉化反應；生物轉化反應條件為：底物D-果糖濃度為0.1％-75％，細胞生物催化劑以游離細胞計對底物溶液的用量為10-200g/L；初始pH?5.0-10.0，轉化反應溫度為20-50℃，150-250r/min搖床培養，轉化反應時間0.5-24h；

C、提純與精制：將轉化反應結束后的反應液用D001型強酸性苯乙烯樹脂進行離子交換，去離子水洗滌，再經U20專用樹脂純化，濃縮，結晶，干燥后即得成品D-阿洛酮糖。