[發明專利]口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 200710182090.0
• 申請日: 2007-10-31
• 公開（公告）號: CN101423874A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發明（設計）人: 劉在新;包慧芳;郭建宏;盧曾軍;謝慶閣
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 孫皓晨;費碧華

1.?一種口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒，包括彼此獨立分裝的以下各組分，各組分的用量至少不低于進行一次RT-PCR反應的用量：RT-PCR反應緩沖液，dNTP混合物，25mmol/L的MgCl₂，反轉錄酶，RNase抑制子，Taq酶，無RNA酶的雙蒸水，正鏈擴增引物和負鏈擴增引物，其特征在于：所述的正鏈擴增引物由以下三種引物組成：引物1：GACTCG/AACGTCTCCC/TGCCAACT，

引物2：ACGACG/CGGGGCTTTTGCTTTCAC，

引物3：CG/TGGAAACGCAC/TGAGCAGTATC；

所述的負鏈擴增引物由以下三種引物組成：

引物4：TGCGG/TACGGCCACC/GTACTACTTC，

引物5：AGCTCCACGAA/GAAA/GGTGTCGAG，

引物6：CGTGATGTG/AGCG/AAGAATGAAGAA。

2.?按照權利要求1的口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述的正鏈擴增引物由引物1、引物2和引物3按照1∶1∶2的重量比例組成；所述的負鏈擴增引物由引物4、引物5和引物6按照1∶1∶2的重量比例組成。

3.?按照權利要求2的口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述的正鏈擴增引物按照以下方法配制得到：將引物1、引物2或引物3分別用自動DNA合成儀合成后，稀釋成濃度為12.5pmol/μl的溶液，再按照1∶1∶2的重量或體積比例配制而成；所述的負鏈擴增引物按照以下方法配制得到：將引物4、引物5或引物6分別用自動DNA合成儀合成后，稀釋成濃度為12.5pmol/μl的溶液，再按照1∶1∶2的重量或體積比例配制而成。

4.?按照權利要求1的口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述的反轉錄酶為AMV?Reverse?Transcriptase?XL；所述的Taq酶是AMV-Optimized?Taq。

5.?按照權利要求1的口蹄疫病毒多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：該檢測試劑盒含有空白對照或/和陽性對照。