[發(fā)明專利]一種微生物柴油的生物合成法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710178064.0
• 申請(qǐng)日: 2007-11-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101445741A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋元達(dá)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京有容建業(yè)科技發(fā)展有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C10G3/00
• 分類號(hào): C10G3/00;C12P7/64;C12P7/18;C12R1/645
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種微生物柴油的制備方法，其特征在于通過(guò)酵母菌發(fā)酵來(lái)合成油脂，然后通過(guò)萃取的方法來(lái)提取微生物菌絲體的油脂(油脂抽提工藝)，最后通過(guò)脂肪酶催化的轉(zhuǎn)脂化反應(yīng)來(lái)制備生物柴油.

2.權(quán)利要求1所述酵母菌的發(fā)酵工藝，其步驟包括原始菌種的活化、液體培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)、一級(jí)發(fā)酵、二級(jí)發(fā)酵、三級(jí)發(fā)酵、四級(jí)發(fā)酵.

3.權(quán)利要求2所述原始菌種的活化，其特征為：將菌種(Rhodotorula?glutinis)接種到斜面培養(yǎng)基上，在25℃培養(yǎng)四至五天.

4.權(quán)利要求2所述液體培養(yǎng)，其特征為：將活化后的菌種接種于500ml的液體培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)，培養(yǎng)器皿為帶磁力攪拌的1L培養(yǎng)瓶，攪拌速度為120轉(zhuǎn)/分，溫度為28-30℃，時(shí)間為16-24小時(shí).

5.權(quán)利要求2所述擴(kuò)大培養(yǎng)，其特征為：液體菌種以10％的比例接種到5L發(fā)酵罐中培養(yǎng).通氣量為1.0-1.5L/min，攪拌400-500轉(zhuǎn)/分，pH為5.5-6.5，溫度為30℃，時(shí)間為18-24小時(shí).

6.權(quán)利要求2所述一級(jí)發(fā)酵，其特征為：將擴(kuò)大培養(yǎng)的菌種以10％的接種量加入到50-500L的發(fā)酵罐中，通氣量為1.0-1.5L/min，攪拌400-500轉(zhuǎn)/分，pH為5.5-6.5，溫度為30℃，時(shí)間為18-24小時(shí).用顯微鏡觀察，無(wú)細(xì)菌污染，可轉(zhuǎn)入二級(jí)發(fā)酵.

7.權(quán)利要求2所述二級(jí)發(fā)酵，其特征為：將一級(jí)發(fā)酵得到的菌種以10％的比例加入到500-5000L二級(jí)發(fā)酵灌中，通氣量為1.0-1.5L/min，攪拌400-500轉(zhuǎn)/分，pH為5.5-6.5，溫度為30℃，時(shí)間為18-24小時(shí).經(jīng)觀察菌絲粗壯健康無(wú)污染，可轉(zhuǎn)入三級(jí)發(fā)酵.

8.權(quán)利要求2所述三級(jí)發(fā)酵，其特征為：將二級(jí)發(fā)酵得到的菌種以10％的比例加入到5000-50000L三級(jí)發(fā)酵灌中，通氣量為1.0-1.5L/min，攪拌400-500轉(zhuǎn)/分，pH為5.5-6.5，溫度為30℃，時(shí)間為18-24小時(shí).經(jīng)觀察菌絲粗壯健康無(wú)污染，可轉(zhuǎn)入四級(jí)發(fā)酵

9.權(quán)利要求2所述四級(jí)發(fā)酵，其特征為：將三級(jí)發(fā)酵得到的菌種以5-10％的比例加入到50000-500000L四級(jí)發(fā)酵灌中，培養(yǎng)液為產(chǎn)脂培養(yǎng)介質(zhì).通氣量為1.5-2.0L/min，攪拌400-500轉(zhuǎn)/分，pH為5.5-6.5，溫度為30℃，時(shí)間為四到五天.發(fā)酵完成后經(jīng)離心過(guò)濾收取菌絲體，

10.權(quán)利要求3所述斜面培養(yǎng)基配方，其特征為：葡萄糖3-5％，NH₄Cl?0.25-0.35％，酵母提取液0.15％，磷酸鹽0.3-0.7％，MgSO₄?0.15％，瓊脂2％，馬鈴薯汁10％.

11.權(quán)利要求4所述液體培養(yǎng)基配方，其特征為：工業(yè)廢水97.5-98.8％，酵母提取液0.15％，尿素0.5-1.0％，磷酸鹽0.3-0.7％，MgSO₄?0.15％，CaCl₂?0.005-0.01％.

12.權(quán)利要求5、6、7、8所述發(fā)酵培養(yǎng)基配方，其特征為：工業(yè)廢水97.5-98.8％，酵母提取液0.15％，尿素0.5-1.0％，磷酸鹽0.3-0.7％，MgSO₄?0.15％，CaCl₂?0.005-0.01％.

13.權(quán)利要求9所述產(chǎn)脂培養(yǎng)基配方，其特征為：工業(yè)廢水92.5-95.8％，糖蜜3-5％，酵母提取液0.15-0.3％，尿素0.3-0.5％，磷酸鹽0.3-0.7％，MgSO₄?0.15％，CaCl₂?0.005-0.01％.

14.權(quán)利要求13所述工業(yè)廢水，特指熱電廠或炸藥廠排放的廢水.

15.權(quán)利要求1所述微生物菌絲體的油脂抽提工藝，其特征包括：(1)將菌絲體在60-90℃下真空干燥15-20分鐘.(2)將干菌絲體機(jī)械粉碎后用有機(jī)溶劑萃取。萃取劑為石油醚，萃取酸度在pH?4.5-5.5，最佳配比為50g干菌體/1L石油醚，萃取時(shí)間為8-16h，操作溫度低于50℃。(3)有機(jī)溶劑通過(guò)蒸溜后回收循環(huán)使用.最大程度上減少環(huán)境污染.