[發(fā)明專利]一種在微通道中固定細(xì)胞的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710173525.5
• 申請(qǐng)日: 2007-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101196514A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳會(huì)靈;紀(jì)季;姜遠(yuǎn)英;曹永兵;陳禮潮;劉寶紅;楊芃原;范國(guó)榮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/48
• 分類號(hào): G01N33/48;C12Q1/00
• 代理公司: 上海德昭知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 丁振英

1.一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，它包括以下步驟：

處理該微通道的內(nèi)壁，使其帶有正、負(fù)電荷中的一種電荷；

將一種與該內(nèi)壁電荷極性相反的聚電解質(zhì)組裝于該微通道內(nèi)壁，以形成一界面；

將荷電的生物聚電解質(zhì)修飾在該界面上；最后，

將含細(xì)胞的培養(yǎng)液引入該微通道內(nèi)，利用細(xì)胞表面的荷電性將細(xì)胞固定在微通道中。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的微通道系由內(nèi)徑為100-500μm的石英毛細(xì)管構(gòu)成。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的處理該微通道的內(nèi)壁是用堿溶液潤(rùn)洗該內(nèi)壁，使其帶負(fù)電。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，對(duì)該內(nèi)壁潤(rùn)洗的時(shí)間為0.2-2小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的將聚電解質(zhì)組裝于該微通道內(nèi)壁，包括將多種荷電相反的聚電解質(zhì)依次層層組裝于該微通道內(nèi)壁，形成一界面。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的聚電解質(zhì)為聚二烯丙基二甲基胺鹽酸鹽(PDDA)溶液和聚苯乙烯磺酸鈉(PSS)溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的將聚電解質(zhì)組裝于該微通道內(nèi)壁，包括將聚電解質(zhì)溶液以100-500μL/h流速引入該微通道內(nèi)并停留5-60分鐘。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的生物聚電解質(zhì)為聚-L-賴氨酸(PLL)溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求1或8所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的將生物聚電解質(zhì)修飾在該界面，包括將生物聚電解質(zhì)溶液以100-500μL/h流速引入該微通道內(nèi)并停留5-60分鐘。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種在微通道中固定細(xì)胞的方法，其特征是，所述的將含細(xì)胞的培養(yǎng)液引入該微通道內(nèi)，利用細(xì)胞表面的荷電性將細(xì)胞固定在微通道中，包括將培養(yǎng)液置入培養(yǎng)箱中12-24小時(shí)，再以30-200μL/h的流速更換培養(yǎng)液。