[發(fā)明專利]鈣網(wǎng)蛋白-VEGFR2融合蛋白及用途

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710173455.3
• 申請(qǐng)日: 2007-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101469024A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-07-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海匯康生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及DNA重組技術(shù)和藥物領(lǐng)域。具體的說(shuō)，本發(fā)明涉及一種鈣網(wǎng)蛋白(Calreticulin)與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)的融合蛋白，提供一種鈣網(wǎng)蛋白與VEGFR2融合蛋白在抗腫瘤血管生成以抑制腫瘤生長(zhǎng)方面的用途。

背景技術(shù)

腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤血管的生成在腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中起著非常關(guān)鍵的作用，一般體積超過(guò)1.0-2.0mm³的腫瘤不僅需要新生血管維持足夠的營(yíng)養(yǎng)供給和排泄代謝產(chǎn)物，還需要提供有利于轉(zhuǎn)移的通道。近年來(lái)，以抑制或破壞腫瘤血管生成為目的的腫瘤治療新方法已成為各國(guó)腫瘤醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

鈣網(wǎng)蛋白(Calreticulin)發(fā)現(xiàn)至今已有十幾年了，其主要功能是儲(chǔ)存鈣。人鈣網(wǎng)蛋白基因的編碼序列有1251個(gè)核苷酸，核苷酸序列見(jiàn)GenBank?No.NM_004343，編碼的鈣網(wǎng)蛋白由417個(gè)氨基酸組成。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其N-端具有抗腫瘤的作用，已證明鈣網(wǎng)蛋白的N-端第1—180位氨基酸或第120—180位氨基酸組成的蛋白質(zhì)可通過(guò)抑制腫瘤的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)而發(fā)揮抗腫瘤作用。

很多研究者都將血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)作為治療靶點(diǎn)，因?yàn)樗鼈冊(cè)谘苌烧{(diào)節(jié)中起著非常重要的作用。其中VEGFR2與內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而且顯著表達(dá)在腫瘤組織中而非正常組織中。VEGF與表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞上的相應(yīng)受體VEGFR2結(jié)合所引起的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是血管生成中的限速步驟，在整個(gè)血管生成中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。國(guó)外有人用可溶性的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(sVEGFR2)競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合VEGF，從而阻斷VEGF與VEGFR2結(jié)合所引發(fā)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，抑制了腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的血管生成和腫瘤的生長(zhǎng)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種鈣網(wǎng)蛋白(Calreticulin)—血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)的融合蛋白，提供一種鈣網(wǎng)蛋白與VEGFR2融合蛋白在抗腫瘤方面的用途。

本發(fā)明的另一目的是提供一種新的具有鈣網(wǎng)蛋白和VEGFR2兩者生物學(xué)活性的藥物，它是此兩者的融合蛋白。

該融合蛋白包括：①鈣網(wǎng)蛋白元件，該元件具有人鈣網(wǎng)蛋白或其活性片段的氨基酸序列。②VEGFR2元件，該元件具有VEGFR2或其活性片段的氨基酸序列。③位于鈣網(wǎng)蛋白元件和VEGFR2元件之間的1—20個(gè)氨基酸的連接肽序列。

具體實(shí)施方式

所述的Calreticulin-VEGFR2融合蛋白是由Calreticulin和VEGFR2基因融合之后進(jìn)行表達(dá)的產(chǎn)物，由合適的氨基酸連接臂連接的Calreticulin-VEGFR2。所述的融合蛋白兼有兩者的生物學(xué)活性，即可通過(guò)Calreticulin?N-端抑制腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)而抗腫瘤，還可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制從而阻斷VEGF與VEGFR2結(jié)合所引發(fā)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，抑制了腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的血管生成和腫瘤的生長(zhǎng)。因此，本發(fā)明所得到的Calreticulin-VEGFR2融合蛋白可以在兩者的協(xié)同下增強(qiáng)抗腫瘤的效果，還可減少兩者分別給藥給患者所帶來(lái)的麻煩和痛苦，為抗腫瘤等治療提供新的化合物。