[發明專利]革蘭陰性需氧菌鑒定板及其制備方法

有效

• 申請號: 200710173067.5
• 申請日: 2007-12-26
• 公開（公告）號: CN101469341A
• 公開（公告）日: 2009-07-01
• 發明（設計）人: 鄒艷芳;陳弛宇;朱駿娜
• 申請（專利權）人: 上海復星佰珞生物技術有限公司;上海復星醫藥(集團)股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12M1/34
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司
• 代理人: 王 巍

技術領域：

本發明涉及生物制劑。具體涉及一種革蘭陰性需氧菌鑒定板及其制備方法。

背景技術

近20年來，由于臨床上廣泛大量地使用種類繁多的抗菌藥物，細菌的耐藥 性越來越普遍，有的細菌可同時耐2-7種藥物，耐藥菌株的廣泛傳播給臨床治療 帶來很大困難，特別是對于醫院內感染的細菌。醫院內感染的特點在于是出現在 醫院環境中的感染，并發生流行，故又可將其稱為醫院獲得性感染(Hospital? acquired?infection)。雖然發生醫院感染的病情有輕有重，但都給病人增加了額外 的痛苦、經濟負擔和不幸，同時也會由于延長住院時間而加重醫療和護理工作的 負擔，影響病床周轉。嚴重的醫院感染往往使病人所患的疾病不能達到預期的療 效，甚至產生難以治療的后遺癥或死亡。據美國的一次不完全統計資料報告，其 住院病人中約有5％發生醫院感染，平均延長住院4～5d，每年約有10萬人死亡 于醫院感染，估計每年由于醫院感染要多消耗20余億美元。

從引起醫院感染的微生物來看，固然有些仍是我們所熟悉的致病性很強的微 生物，但是近年來醫院感染的病原體種類有明顯變化的趨勢，革蘭氏陰性菌已取 代了原來為主要病原的革蘭氏陽性球菌，其中腸桿菌科及假單胞菌約占醫院感染 的60％-65％，并且主要為多耐藥性細菌。由于廣泛地應用抗生素，細菌的不斷 變遷，助長了醫院內感染的存在和發展，今日的臨床微生物學最重要的特點是向 醫院感染方面轉變。

微生物鑒定及藥敏分析系統是主要應用于臨床實驗室的高科技體外診斷產 品，對輔助臨床各科室診斷治療具有重要意義。目前在國際上，對細菌的快速鑒 定和藥敏分析已經取得了很大的進展，微生物自動化檢測產品逐步替代了手工檢 測，而國內的同類研究尚處在探索階段。

目前，國際上同類產品主要有：法國生物-梅里埃公司的VITEK-AMS微生 物分析系統、美國Dade-MicroScan公司的MicroScan自動微生物鑒定和藥敏測 試系統以及英國Trek?Diagnostic?System?Ltd.的SENSTITRE熒光法快速微生物鑒 定和藥敏分析系統。它們的工作原理相近，主要是根據細菌理化性質的差異，采 用光電比色，測定細菌生長分解底物導致PH值改變而產生的不同顏色和濁度變 化來判斷反應情況，從而給出鑒定藥敏結果。

國內也有少數廠家正在研究開發類似產品，如湖南天地人的微生物系統等。 但是由于此類項目技術含量較高，資金投入大，尤其是菌庫的積累耗時耗力，所 以目前國內類似產品還很不成熟。在臨床推廣上，微生物鑒定主要存在以下幾個 方面的問題：

(1)鑒定時間偏長，需要16-24小時給出結果；

(2)鑒定范圍比較狹窄，可以鑒定的細菌只有300余種。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于克服上述不足之處，研究設計一種快速準確 革蘭陰性需氧菌鑒定板。

本發明的鑒定檢測實驗基于下列原理：

根據目前微生物鑒定領域權威的伯杰細菌鑒定手冊，細菌的鑒定主要通過檢 測細菌對各種營養物質的利用情況，即通過檢測細菌生化反應特性來鑒定細菌。 而細菌利用營養物質發生生化反應的過程中，會發生一系列的氧化還原反應，這 些氧化還原反應中會產生NADH，而NADH能夠把四唑紫(2，3，5-triphenyl? tetrazolium?chloride，TTC)指示劑由無色的氧化型轉變為紫色的還原型。因此我 們使用四唑紫作為細菌發生生化反應的指示劑，來檢測細菌的生化反應特性，從 而達到細菌鑒定的目的。

不同細菌利用不同碳源或氮源進入新陳代謝過程，而對其他一些碳源或氮源 則無法利用，這些特性是細菌的遺傳物質所決定的。目前現有的微生物鑒定板最 多只有30個生化反應，因此對于鑒定細菌的種類方面比較狹窄，可以鑒定的革 蘭陰性菌種類最多只有200余種，且不同種類的細菌需要使用不同種類的板條進 行鑒定，同時需要通過補充實驗進行驗證才能得出鑒定結果，操作比較繁瑣。