[發(fā)明專利]一種增敏腫瘤細(xì)胞藥劑及其應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710164522.5
• 申請(qǐng)日: 2007-12-10
• 公開（公告）號(hào): CN101181268A
• 公開（公告）日: 2008-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐修文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/4375
• 分類號(hào): A61K31/4375;A61P35/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司
• 代理人: 馮子玲

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)生物技術(shù)，涉及新藥的研發(fā)，具體為一種增敏腫瘤細(xì)胞藥劑即先導(dǎo)化合物ZDAK01(氯化甲氧檗因coralyne?chloride)，以及在抗腫瘤中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

因腫瘤而死亡的患者中90％與腫瘤細(xì)胞的耐藥性有關(guān)，特別是多藥耐藥性(multidrugresistance，MDR)，這是指腫瘤細(xì)胞對(duì)一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性的同時(shí)，對(duì)結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制不同的其他抗腫瘤藥物也都產(chǎn)生交叉耐藥性。導(dǎo)致產(chǎn)生多藥耐藥性的因素中，與細(xì)胞膜有關(guān)的主要因素有P-糖蛋白(P-gp)、多藥耐藥性相關(guān)蛋白(MRP)和肺多藥耐藥性相關(guān)蛋白(LRP)等，與細(xì)胞質(zhì)有關(guān)的主要因素有凋亡抑制蛋白(I-APs)。拓?fù)洚悩?gòu)酶II、蛋白激酶C和谷胱苷肽氧化還原系統(tǒng)等。但最重要、最常見的為P-gp，也稱典型MDR，其為一種廣泛存在于多種腫瘤細(xì)胞胞膜上的蛋白，負(fù)責(zé)將細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外，從而引起腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥性，降低腫瘤化療的療效。另一方面可能是因?yàn)橐恍┠退幍鞍椎谋磉_(dá)增加或活力升高導(dǎo)致細(xì)胞自身的生存能力增強(qiáng)所致，從而腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生了耐藥性。理論上，克服多藥耐藥性主要有兩種途徑，一種是開發(fā)對(duì)MDR、細(xì)胞不具有耐藥性的新抗癌藥物，另一種途徑是尋找MDR的逆轉(zhuǎn)劑與抗癌藥物合用，恢復(fù)MDR細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的敏感性。在腫瘤化療領(lǐng)域中，克服多藥耐藥性的研究一直方興未艾，也是腫瘤化療領(lǐng)域急需解決的難題。

Nrf2/ECH(NF-E2-related?factor2或Chicken?erythroid-derived?CNC-homology?factor)是一種66-kDa蛋白，含有一高度保守的堿性亮氨酸拉鏈(bZIP)結(jié)構(gòu)，屬于CNC(cap-‘n’-collar)轉(zhuǎn)錄因子家族成員，最初被Moi等人分離得到。常態(tài)下，胞漿中的Nrf2被胞漿蛋白伴侶分子Keapl(Kelch-like?ECH-associated?protein1)的DGR區(qū)結(jié)合從而處于抑制狀態(tài)，Keap1同時(shí)可促進(jìn)Nrf2的泛素蛋白酶體途徑降解過程。活性氧及親核劑等氧化應(yīng)激源作用下，Nrf2脫離Keap1，轉(zhuǎn)移入核，通過bZIP與小分子Maf蛋白異二聚化之后二聚體與抗氧化元件ARE上GCTGAGTCA位點(diǎn)結(jié)合，啟動(dòng)受ARE調(diào)節(jié)的基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。基因分析顯示，ARE是一個(gè)特異的DNA-啟動(dòng)子結(jié)合部位，位于谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)、NAD(P)H：醌氧化還原酶1(NQO1)、UDP-葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶(UGT)、微粒體環(huán)氧化物水解酶、谷氨酰半胱氨酸連接酶GCL(含GCLC和GSLM兩個(gè)亞基)、谷胱甘肽合成酶、過氧化氫酶(CAT)、超氧化物岐化酶(SOD)、血紅素氧化酶(HO-1)、醛脫氫酶、醛酮還原酶、AKR1C1(醇醛酮還原酶家族1，成員C1)等II相解毒酶和抗氧化酶基因的5’側(cè)翼區(qū)域，其能被多種抗氧化性和(或)親電性物質(zhì)激活，從而激活I(lǐng)I相解毒酶和抗氧化酶基因的表達(dá)，進(jìn)而增加細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抗性。Nrf2的激活受多個(gè)水平的調(diào)控，主要涉及Nrf2與Keap1的相互作用。Nrf2從Keap1解離是Nrf2激活的重要環(huán)節(jié)，主要通過兩種途徑，其一是親核物質(zhì)或活性氧(reactive?oxygen?species，ROS)直接攻擊作用；其二是磷酸化的間接作用。目前認(rèn)為促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、蛋白激酶C(PKC)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)等幾條蛋白激酶途徑參與了Nrf2-ARE通路激活和其依賴基因表達(dá)的調(diào)控。Nrf2、Keap1和ARE是Nrf2-ARE信號(hào)系統(tǒng)的軸心元件。激活Nrf2-ARE信號(hào)通路能上調(diào)很多II相解毒酶和抗氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄活性，從而表達(dá)一些抗致癌物、氧化劑和其他有毒化學(xué)物質(zhì)的基因產(chǎn)物，起細(xì)胞保護(hù)作用。Nrf2是調(diào)控細(xì)胞對(duì)抗有害環(huán)境因素的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，Nrf2缺失或激活障礙，會(huì)引起細(xì)胞對(duì)應(yīng)激源的敏感性增高，可加重氧化應(yīng)激源的細(xì)胞毒性，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙、凋亡甚至死亡，其與化學(xué)促癌的發(fā)生、炎癥修復(fù)進(jìn)程延長、細(xì)胞凋亡等病變密切相關(guān)。

近幾年來，對(duì)一些抗癌藥的耐藥性研究表明Nrf2調(diào)控的一系列基因與MDR有很大的關(guān)系，這是腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥產(chǎn)生耐藥性的一條重要途徑。某些抗腫瘤藥能在腫瘤細(xì)胞中激活Nrf2轉(zhuǎn)錄而導(dǎo)致第II相解毒酶和抗氧化酶基因表達(dá)量的增加，提高腫瘤細(xì)胞對(duì)氧化應(yīng)激的抵抗能力，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥的抗性，引起很多種腫瘤對(duì)這些抗癌藥物產(chǎn)生耐藥性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是以Nrf2為腫瘤耐藥性的分子靶標(biāo)，篩選Nrf2的拮抗劑，達(dá)到致敏腫瘤細(xì)胞的作用，降低腫瘤耐藥性。