[發明專利]芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞及其制備方法

無效

• 申請號: 200710151907.8
• 申請日: 2007-09-20
• 公開（公告）號: CN101157915A
• 公開（公告）日: 2008-04-09
• 發明（設計）人: 張繼;王文強;王云普;姚健;張生堂;梁俊玉
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: C12N11/04
• 分類號: C12N11/04;C12N11/14;C12N1/16
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司
• 代理人: 王德楨

1.芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞，其特征在于，是由下述體積份數的原料制成：

芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液????40～60份；

復合多糖水溶液????????????????????40～60份；

釀酒酵母菌懸液????????????????????10份

氯化鉀水溶液??????????????????????120～180份；

所述的芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液的濃度是0.02～0.04克/毫升；所述的復合多糖水溶液是濃度為0.024～0.048克/毫升的卡拉膠和瓜爾豆膠的混合水溶液，其中卡拉膠和瓜爾豆膠的重量比為5∶0.8～1.2；所述的釀酒酵母菌懸液為接種釀酒酵母于麥芽汁液體培養基中，25～30℃條件下培養45～50小時，然后在室溫下2800～3200轉/分鐘離心4～6分鐘，去除上清液，加復合多糖水溶液0.17-0.25倍體積的無菌水，制得的釀酒酵母菌懸液；所述的氯化鉀水溶液的重量百分濃度為1.5～2.5％。

2.根據權利要求1所述的芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞，其特征在于：所述的復合多糖水溶液是復合多糖在80～120℃的水中溶解后，降溫保持在55～65℃的濃度為0.024～0.048克/毫升的卡拉膠和瓜爾豆膠混合水溶液。

3.芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟：

1)選用下述體積份數的原料：

芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液????40～60份；

復合多糖水溶液????????????????????40～60份；

釀酒酵母菌懸液????????????????????10份

氯化鉀水溶液????120～180份；

所述的芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液的濃度是0.02～0.04克/毫升；

所述的復合多糖水溶液是濃度為0.024～0.048克/毫升的卡拉膠和瓜爾豆膠的混合水溶液，其中卡拉膠和瓜爾豆膠的重量比為5∶0.8～1.2，且所述的復合多糖水溶液是復合多糖在80～120℃的水中溶解后，降溫保持在55～65℃的濃度為0.024～0.048克/毫升的卡拉膠和瓜爾豆膠混合水溶液；

所述的釀酒酵母菌懸液為接種釀酒酵母于麥芽汁液體培養基中，25～30℃條件下培養45～50小時，然后在室溫下2800～3200轉/分鐘離心4～6分鐘，去除上清液，加復合多糖水溶液0.17-0.25倍體積的無菌水，制得的釀酒酵母菌懸液；

所述的氯化鉀水溶液的重量百分濃度為1.5～2.5％；

2)在溫度為55℃～65℃、轉速為500～600轉/分鐘的條件下，將復合多糖水溶液加入到芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液中，保持溫度在55℃～65℃之間25～35分鐘，加熱至110～120℃，保持15～25分鐘，然后冷卻至40℃，加入釀酒酵母菌懸液，攪拌均勻，備用；

3)在120～150轉/分鐘的轉速且無菌條件下，將上述步驟2)制得的混合溶液加入到3～5℃氯化鉀水溶液中；固化2～5小時；

4)過濾去除氯化鉀水溶液，用生理鹽水洗滌2～4次，即制得芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞。

4.根據權利要求3所述的芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞的制備方法，其特征在于：所述的芐基三甲基有機膨潤土懸浮水溶液的制備方法是，將芐基三甲基有機膨潤土置于水中，在20～25℃、40Hz的條件下，用超聲波超聲分散8～12分鐘。

5.根據權利要求3所述的芐基三甲基有機膨潤土、生物多糖復合載體固定化釀酒酵母細胞的制備方法，其特征在于：所述氯化鉀水溶液在110～120℃條件下滅菌15～25分鐘。