[發(fā)明專利]一種乙酰酯酶及其編碼基因無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710151277.4 | 申請日: | 2007-09-18 |
| 公開(公告)號: | CN101392263A | 公開(公告)日: | 2009-03-25 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王磊;劉雪倩;馮露 | 申請(專利權(quán))人: | 天津生物芯片技術(shù)有限責(zé)任公司 |
| 主分類號: | C12N15/55 | 分類號: | C12N15/55;C12N9/16;C12N1/21 |
| 代理公司: | 北京連和連知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人: | 姜兆元 |
| 地址: | 300457天津市經(jīng)*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 乙酰 及其 編碼 基因 | ||
1.一種編碼乙酰酯酶的基因,其特征在于:所述基因具有選自于下列a)、b)或c)的核苷酸序列:
a)SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列;
b)由于遺傳密碼的簡并性,不同于SEQ?ID?NO:1但編碼的氨基酸序列與SEQ?ID?NO:1所編碼的氨基酸序列相同的核苷酸序列;
c)在嚴(yán)格雜交條件下與上述a)或b)中的序列雜交,并且編碼具有活性的乙酰酯酶的核苷酸序列。
2.一種乙酰酯酶,其特征在于:所述乙酰酯酶具有選自于下列d)、e)或f)的氨基酸序列:
d)上述a)、b)或c)所述的核苷酸序列編碼的氨基酸序列;
e)SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列;
f)上述e)中缺失、替換或插入一個或多個氨基酸后的氨基酸序列,并且具有該序列的蛋白質(zhì)有乙酰酯酶的活性。
3、根據(jù)權(quán)利要求2所述一種乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶的反應(yīng)溫度為60℃,反應(yīng)pH值為7.2。
4、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述一種乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶具有與SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列至少70%的同源性,同時具有該序列的蛋白質(zhì)具有乙酰酯酶的活性。
5、根據(jù)權(quán)利要求4所述一種乙酰酯酶,其特征在于,所述乙酰酯酶具有與SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列至少90%的同源性,同時具有該序列的蛋白質(zhì)具有乙酰酯酶的活性。
6、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述一種乙酰酯酶,其特征在于,所述具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列中缺失、替換、或插入的多個氨基酸序列為2-100個。
7、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述一種乙酰酯酶,其特征在于,所述具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列中缺失、替換、或插入的多個氨基酸序列為2-10個。
8、一種表達(dá)乙酰酯酶的重組質(zhì)粒,其特征在于,其至少包括權(quán)利要求1所述編碼乙酰酯酶的基因。
9、根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種表達(dá)乙酰酯酶的重組質(zhì)粒,其特征在于,所述重組質(zhì)粒的載體為pET-28a(+)。
10、一種產(chǎn)生權(quán)利要求2或3所述的乙酰酯酶的重組菌,其特征在于,該重組菌內(nèi)導(dǎo)入了權(quán)利要求1所述的編碼乙酰酯酶的基因。
11、根據(jù)權(quán)利要求10所述的一種產(chǎn)生乙酰酯酶的重組菌,其特征在于,所述重組菌為大腸桿菌。
12、根據(jù)權(quán)利要求11所述的一種產(chǎn)生乙酰酯酶的重組菌,其特征在于,所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21菌株。
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