[發(fā)明專利]抗昆蟲的轉(zhuǎn)基因植物以及用于改善δ－內(nèi)毒素抵抗目標(biāo)昆蟲活性的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710141973.7
• 申請(qǐng)日: 1998-12-17
• 公開（公告）號(hào): CN101220087A
• 公開（公告）日: 2008-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·恩格利斯;S·M·布魯索克;T·M·馬爾瓦;J·W·布賴森;C·A·庫勒斯扎;F·S·瓦爾特斯;S·L·斯拉廷;M·A·馮特爾施;C·羅馬諾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 孟山都技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/325
• 分類號(hào): C07K14/325;C12N15/32;A01P7/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司
• 代理人: 劉玥

1.一種修飾的蘇云金芽胞桿菌Cry3Bb*多肽，其在序列編號(hào)：98的Cry3Bb多肽的一級(jí)序列的α螺旋4中或附近包含一個(gè)或多個(gè)點(diǎn)突變，其中所述一個(gè)或多個(gè)點(diǎn)突變導(dǎo)致至少一個(gè)氨基酸替代，所述替代選自：Leu158被精氨酸替代，Ser160被天冬酰胺替代，Lys161被脯氨酸替代，Arg162被組氨酸替代，Asp165被甘氨酸替代，Lys189被甘氨酸替代。

2.權(quán)利要求1的Cry3Bb*多肽，其包含選自序列編號(hào)：2、序列編號(hào)：44、序列編號(hào)：46、序列編號(hào)：50、序列編號(hào)：54、序列編號(hào)：56、序列編號(hào)：58、序列編號(hào)：60、序列編號(hào)：62、序列編號(hào)：66和序列編號(hào)：108的氨基酸序列。

3.權(quán)利要求2的Cry3Bb*多肽，其被選自序列編號(hào)：1、序列編號(hào)：43、序列編號(hào)：45、序列編號(hào)：49、序列編號(hào)：53、序列編號(hào)：55、序列編號(hào)：57、序列編號(hào)：59、序列編號(hào)：61、序列編號(hào)：65和序列編號(hào)：107的核酸序列編碼。

4.權(quán)利要求1的Cry3Bb*多肽，其包含其中Asp165被甘氨酸替代的氨基酸替代，并進(jìn)一步包含選自His231被精氨酸替代、Ser311被亮氨酸替代、Asn313被蘇氨酸替代、Glu317被賴氨酸替代和Gln348被精氨酸替代的一個(gè)或多個(gè)氨基酸替代。

5.權(quán)利要求4的Cry3Bb*多肽，其包含選自序列編號(hào)：60、序列編號(hào)：62、序列編號(hào)：66和序列編號(hào)：108的氨基酸序列。

6.權(quán)利要求5的Cry3Bb*多肽，其被選自序列編號(hào)：59、序列編號(hào)：61、序列編號(hào)：65和序列編號(hào)：107的核酸序列編碼。

7.一種包含殺蟲有效量的權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的Cry3Bb*多肽的組合物。

8.權(quán)利要求7的組合物，其包含0.5％至99重量％的Cry3Bb*多肽。

9.權(quán)利要求7的組合物，其可通過包括以下步驟的方法進(jìn)行制備：

(a)在能夠有效產(chǎn)生殺蟲多肽的條件下培養(yǎng)蘇云金芽胞桿菌NRRLB-21744、NRRL?B-21745、NRRL?B-21748、NRRL?B-21750、NRRL?B-21751、NRRL?B-21752、NRRL?B-21753、NRRL?B-21754、NRRL?B-21756、NRRLB21759或EG11098細(xì)胞，以及

(b)從所述細(xì)胞中獲得所述殺蟲多肽。

10.權(quán)利要求7的組合物，其包含蘇云金芽胞桿菌NRRL?B-21744、NRRL?B-21745、NRRL?B-21748、NRRL?B-21750、NRRL?B-21751、NRRLB-21752、NRRL?B-21753、NRRL?B-21754、NRRL?B-21756、NRRL?B-21759或EG11098細(xì)胞。

11.權(quán)利要求10的組合物，所述組合物含有蘇云金芽胞桿菌NRRLB-21744、NRRL?B-21745、NRRL?B-21748、NRRL?B-21750、NRRL?B-21751、NRRL?B-21752、NRRL?B-21753、NRRL?B-21754、NRRL?B-21756、NRRLB21759或EG11098細(xì)胞的細(xì)胞提取物、細(xì)胞懸浮液、蛋白部分、晶體部分、細(xì)胞培養(yǎng)物、細(xì)胞勻漿物、細(xì)胞裂解物、細(xì)胞上清液、細(xì)胞過濾物或細(xì)胞沉淀物。

12.權(quán)利要求11的組合物，其被配制成粉末、顆粒、噴霧劑、乳劑、膠體或溶液。

13.權(quán)利要求12的組合物，其中所述組合物是通過干燥、凍干、勻漿、冷凍干燥、乳化作用、蒸發(fā)、分離、提取、過濾、離心、沉降、稀釋、結(jié)晶或濃縮制備的。

14.一種多聚核苷酸，其含有編碼權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的Cry3Bb*多肽的核酸序列。

15.權(quán)利要求14的多聚核苷酸，其特征是DNA、cDNA、rRNA或mRNA.

16.權(quán)利要求14的多聚核苷酸，其中所述核酸序列選自序列編號(hào)：1、序列編號(hào)：43、序列編號(hào)：45、序列編號(hào)：49、序列編號(hào)：53、序列編號(hào)：55、序列編號(hào)：57、序列編號(hào)：59、序列編號(hào)：61、序列編號(hào)：65和序列編號(hào)：107。