[發(fā)明專利]一種生物芯片片基處理方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710134477.9
• 申請(qǐng)日: 2007-10-30
• 公開（公告）號(hào): CN101424682A
• 公開（公告）日: 2009-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳堂明;潘能科;陸冬雷;張必達(dá);江晨亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇三聯(lián)生物工程有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/48
• 分類號(hào): G01N33/48;C12Q1/00
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 樓高潮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物材料領(lǐng)域。

背景技術(shù)

目前，硬質(zhì)基片形式的生物芯片的制作，主要是將玻璃片或硅片 等硬質(zhì)基片經(jīng)表面化學(xué)處理后，直接在基片上合成探針，或者將合成 好的探針、抗體、抗原等生物樣品點(diǎn)加到基片上，通過化學(xué)結(jié)合反應(yīng)， 將生物樣品固定在硬質(zhì)基片上，它的優(yōu)點(diǎn)在于樣品固定牢固，精密度 好，但它的缺點(diǎn)在于玻璃片片基邊框效應(yīng)明顯，精密度仍未能滿足臨 床使用要求，生物樣品與片基結(jié)合量低，固定樣品活性降低快等。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種能降低芯片片基邊框效 應(yīng)，精密度能滿足臨床使用要求，生物樣品與片基結(jié)合量高，固定樣 品活性降低慢的生物芯片片基處理方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：

(1)將H₂SO₄與H₂O₂按體積比50％-80％∶20％-50％攪拌混勻，配 成芯片片基處理液；

(2)將芯片片基浸入片基處理液中，室溫處理12-36小時(shí)；

(3)取出純化水超聲洗滌5次，10min/次；

(4)風(fēng)干；

(5)浸入5％-30％KOH溶液，室溫反應(yīng)30-120分鐘；

(6)取出用純化水沖洗3次；

(7)60攝氏度烘干；

(8)冷卻至室溫；

(9)將3-氨丙基三乙氧基硅烷用純化水配成1％-12％溶液后，加入 0.1％果糖配成硅化溶液；

(10)浸入硅化溶液中，室溫避光反應(yīng)30分鐘；

(11)取出用超純水漂洗2次；

(12)120-180攝氏度干燥30分鐘；

(13)冷卻至室溫；

(14)將戊二醛配成1％-10％水溶液后加入1％果糖，用5％NaOH溶 液調(diào)pH至8.0-10，制成醛化溶液；

(15)將硅化片基進(jìn)入醛化溶液，30-45攝氏度反應(yīng)10-90分鐘；

(16)超純水漂洗6次；

(17)110攝氏度干燥10-40分鐘；

(18)冷卻至室溫。

有益效果：本發(fā)明的生物芯片片基處理方法，通過在片基前處理中 加入H₂SO₄與H₂O₂以及KOH對(duì)表面進(jìn)行預(yù)處理，在表面活化過程中 加入果糖和適當(dāng)?shù)墓柰闈舛取⑽於舛纫约斑m度的高溫烘烤，制出 的生物芯片片基，邊框效應(yīng)低，精密度高，固定樣品活性降低慢，生 物樣品與片基結(jié)合量高。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

(1)將H₂SO₄與H₂O₂按體積比50％∶50％攪拌混勻，配成片基處理 液

(2)浸入片基處理液中，室溫處理12小時(shí)

(3)取出純化水超聲洗滌5次，10min/次

(4)風(fēng)干

(5)浸入5％KOH溶液，室溫反應(yīng)30分鐘

(6)取出用純化水沖洗3次

(7)60攝氏度烘干

(8)冷卻至室溫

(9)將3-氨丙基三乙氧基硅烷用純化水配成1％溶液后，加入0.1％ 果糖配成硅化溶液

(10)浸入硅化溶液中，室溫避光反應(yīng)30分鐘

(11)取出用超純水漂洗2次

(12)120攝氏度干燥30分鐘

(13)冷卻至室溫

(14)將戊二醛配成1％水溶液后加入1％果糖，用5％NaOH溶液調(diào) pH至8.0，制成醛化溶液

(15)將硅化片基進(jìn)入醛化溶液，30攝氏度反應(yīng)10分鐘

(16)超純水漂洗6次

(17)110攝氏度干燥10分鐘

(18)冷卻至室溫

實(shí)施例2

(1)將H₂SO₄與H₂O₂按體積比55％∶45％攪拌混勻，配成片基處理 液

(2)浸入片基處理液中，室溫處理16小時(shí)