[發(fā)明專利]檢測(cè)胃組織細(xì)胞中人VLDLR基因的失活的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710097943.0
• 申請(qǐng)日: 2007-04-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101092650A
• 公開(kāi)（公告）日: 2007-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高田久;井本逸勢(shì);稻澤讓治
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 富士膠片株式會(huì)社;國(guó)立大學(xué)法人東京醫(yī)科齒科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 丁業(yè)平;張?zhí)焓?/td>

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測(cè)胃組織細(xì)胞中人極低密度脂蛋白受體(Very?LowDensity?Lipoprotein?Receptor)(人VLDLR))基因的失活的方法。

背景技術(shù)

在日本，每年有100,000人以上會(huì)患上胃癌(Gastric?Cancer，GC)，其中男性較多，男女比例為約2∶1，是男性中最多發(fā)的癌癥。在日本每年的胃癌死亡人數(shù)約為50,000人，占全部因癌死亡人數(shù)的16％。根據(jù)迄今為止的研究，認(rèn)為是胃組織細(xì)胞在細(xì)胞分化和增殖的過(guò)程中一連串地發(fā)生了基因的變化，其結(jié)果是最終導(dǎo)致了癌化?？墒?，還不明確到底是怎樣的基因變化誘導(dǎo)了胃組織細(xì)胞的癌化。因此，現(xiàn)有狀況是還不存在胃癌的檢測(cè)方法和胃癌惡性程度的檢測(cè)方法。

在胃癌的診斷中，使用的是例如胃X射線檢查、胃內(nèi)窺鏡、血中胃蛋白酶原值、腫瘤標(biāo)記，其中胃內(nèi)窺鏡(能夠得到確診的唯一檢測(cè)方法)被廣泛使用?？墒?，這些大多屬于影像診斷、早期診斷的工具，并不是癌的確診、分型、進(jìn)度判定、有否轉(zhuǎn)移的判定方法。

著眼于基因的胃癌的檢測(cè)方法已知有例如專利文獻(xiàn)1記載的方法?？墒?，該方法是著眼于基因表達(dá)譜(expression?profile)變化的一種方法?；虮磉_(dá)譜的測(cè)定是多個(gè)mRNA量的測(cè)定，由于mRNA非常不穩(wěn)定，容易分解，而且表達(dá)的動(dòng)態(tài)范圍(dynamic?range)也比較大，所以通過(guò)微陣列(microarray)等測(cè)定的再現(xiàn)性就比較差。因此，需要一種更加穩(wěn)定、再現(xiàn)性高的方法。

比較基因組雜交(Comparative?Genomic?Hybridization(CGH))是一種檢測(cè)基因組中基因擴(kuò)增的靈敏度高、效率優(yōu)異的方法，本發(fā)明人采用該CGH陣列法鑒定了在胃癌細(xì)胞中擴(kuò)增的基因群，即在染色體2p24.1擴(kuò)增的SDC1基因、在染色體2p23.3擴(kuò)增的DNMT3A基因、在染色體3p22.3擴(kuò)增的MLH1基因、在染色體3p22.1擴(kuò)增的CTNNB1基因等(非專利文獻(xiàn)1)。

一般來(lái)說(shuō)，基因水平上的癌化結(jié)構(gòu)已經(jīng)報(bào)道了如上所述的多個(gè)基因的擴(kuò)增和癌抑制基因的缺失。在采用定位克隆等通常的方法的情況下，特定基因缺失的鑒定是非常費(fèi)時(shí)費(fèi)力的，很難發(fā)現(xiàn)目的基因。而且，即便是CGH法，采用通常的中期染色體的方法檢測(cè)小于5-10Mb大小的基因組DNA的缺失也是非常困難的(非專利文獻(xiàn)2和3)。通過(guò)染色體作圖法(chromosome?mapping)逐步縮小同源接合體缺失區(qū)域，最終鑒定出了目的癌抑制基因例如DPC4/SMAD4、RB1、PTEN、p16-INK4A、RASSF1等。

非專利文獻(xiàn)1：Takada?H，Imoto?I，Tsuda?H，Sonoda?I，Ichikura?T，Mochizuki?H，Okanoue?T，Inazawa?J.：Screening?of?DNA?copy-numberaberration?in?gastric?cancer?cell?lines?by?array-based?comparativegenomic?hybridization.Cancer?Sci.2005?Feb；96(2)：100-10

非專利文獻(xiàn)2：Bentz，M.，Plesch，A.，Stilgenbauer，S.，Dohner，H.&Lichter，P.：Minimal?sizes?of?deletions?detected?by?comparativegenomichybridization，Genes?chromosomes?Cancer，172-175，1998.

非專利文獻(xiàn)3：Kirchhoff，M.，Gerdes，T.，Maahr，J.，Rose，H.，Bentz，M.，Dohner，H.&Lundsteen，C.：Deletions?below?10?megabasepairs?are?detected?in?comparative?genomic?hybridization?by?standardreference?intervas，Genes?chromosomes?Cancer，410-413，1999.

專利文獻(xiàn)1：特表2005-514051號(hào)公報(bào)。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的問(wèn)題