[發(fā)明專利]膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710094432.3
• 申請日: 2007-12-11
• 公開（公告）號: CN101455585A
• 公開（公告）日: 2009-06-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張靜喆;劉建文;顧宏剛;章學(xué)林;梁曉強(qiáng);馬恩偉;李炯;林天碧;孫遜;蔣紅偉;方邦江;朱培庭;山冬梅;房一時(shí);葉依依;李長龍;吳宏忠;鄧婉利;孫麗娟;徐文;于有軍;王芳;王勁;李艾斯
• 申請（專利權(quán)）人: 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院;華東理工大學(xué)
• 主分類號: A61B19/00
• 分類號: A61B19/00
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 丁紀(jì)鐵

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，尤其是涉及一種膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。

技術(shù)背景

膽石癥是一種嚴(yán)重危害人類健康的常見病，膽石癥可發(fā)生于膽囊、肝內(nèi)膽管和膽總管。膽結(jié)石臨床大致可分為膽固醇結(jié)石和膽色素結(jié)石。

現(xiàn)今，人們一般通過構(gòu)建膽石癥動(dòng)物模型，運(yùn)用科學(xué)方法，通過研究模型動(dòng)物從而尋找膽石癥的病因，預(yù)防膽石形成、結(jié)石攜帶癥狀發(fā)作和膽石清除后復(fù)發(fā)，從根本上尋找防治膽石病徹底有效的辦法。

致石飼料所致豚鼠膽結(jié)石模型造模方法為：體重250-300g豚鼠，以致石飼料喂養(yǎng)6周。實(shí)驗(yàn)期間，不限飲食。一般該模型成石率為80％左右，豚鼠死亡率近60％，形成結(jié)石外形不規(guī)則，呈棕黑色泥沙樣或棕色絮狀沉淀(朱培庭等，升清膠囊對豚鼠膽石病相關(guān)基因的影響，中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2005年5月第3卷第3期)。致石飼料配方：正常飼料45.43g，致石性藥物4.57g(其中酪蛋白1g、蔗糖1.5g、豬油1g、微晶纖維素1g、膽酸0.2g、膽固醇0.05g)。

一般林可霉素誘導(dǎo)豚鼠膽色素結(jié)石模型方法為：體重450-500g豚鼠，以鹽酸林可霉素60mg/kg/天劑量大腿根部皮下注射7天。實(shí)驗(yàn)期間，不限飲食。實(shí)驗(yàn)期間使用普通飼料喂飼(侯中偉，大柴胡湯加減沖劑防治豚鼠膽紅素結(jié)石模型的實(shí)驗(yàn)研究，中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫)。一般該模型所形成的結(jié)石大小不一，形狀不規(guī)則，多為白色絮狀沉淀，亦有砂石樣沉淀。

上述2種方法存在一定的問題，一是造模時(shí)間長(6周)且死亡率過高(近60％)，二是形成多為白色絮狀沉淀，相對較少形成泥沙樣沉淀，因此，造模成功率相對較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提出一種能減少造模時(shí)間并能提高造模成功率的膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是在林可霉素誘導(dǎo)膽色素結(jié)石形成過程中使用致石飼料替代普通飼料。具體構(gòu)建方法是：選取體重為300-600g的豚鼠，用鹽酸林可霉素以6-600mg/kg/天的劑量在豚鼠的大腿根部皮下注射3-6天，造模期間以致石飼料喂養(yǎng)豚鼠。

本發(fā)明在造模時(shí)使用的致石飼料最好由通常飼料4.5-450份和致石性藥物0.45-45份構(gòu)成，所使用的致石性藥物的組成和含量最好為：酪蛋白0.1-10份、蔗糖0.15-15份、豬油0.1-10份、微晶纖維素0.1-10份、膽酸0.002-0.2份、膽固醇0.005-0.5份。

本發(fā)明在造模時(shí)選取的豚鼠最好為普通級雄性豚鼠。

相對現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明動(dòng)物模型的構(gòu)建方法安全可靠，減少了豚鼠膽色素模型造模時(shí)間、提高造模成功率和造模效率，具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例1之膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型豚鼠膽囊狀況對比圖。

圖2是本發(fā)明實(shí)施例2之膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型豚鼠膽囊狀況對比圖。

圖3是本發(fā)明實(shí)施例3之膽色素結(jié)石豚鼠動(dòng)物模型豚鼠膽囊狀況對比圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

1、材料和方法

1.1?藥品及試劑

鹽酸林可霉素(SPECTINOMYCIND?lincomycin?hydrochloride)，注射液，上海禾豐制藥有限公司生產(chǎn)；豚鼠飼料及豚鼠致石飼料，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，每份致石飼料含：正常飼料45.43g和致石性藥物4.57g(致石性藥物中含：酪蛋白1g、蔗糖1.5g、豬油1g、微晶纖維素1g、膽酸0.2g、膽固醇0.05g)。

1.2?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

普通級雄性豚鼠(guinea-pig)，購自上海市奉賢縣泰日鎮(zhèn)銀根養(yǎng)兔室，體重450±50g。

2、動(dòng)物模型的構(gòu)建

雄性豚鼠24只，隨機(jī)分為正常對照組、膽色素結(jié)石模型組1，膽色素結(jié)石模型組2，每組8只。

正常對照組用以生理鹽水60mg/kg/天劑量大腿根部皮下注射連續(xù)7天。

模型組1用以鹽酸林可霉素60mg/kg/day劑量大腿根部皮下注射造模5天，第6天起用以生理鹽水60mg/kg/天劑量大腿根部皮下注射2天；

模型組2用以鹽酸林可霉素60mg/kg/天劑量大腿根部皮下注射造模7天，同時(shí)實(shí)驗(yàn)期間，模型組1喂以致石飼料，模型組2喂以普通飼料，其它不限飲食，每日喂以適量青菜。

實(shí)驗(yàn)的第8天(即模型組2最后一劑林可霉素后24小時(shí))，戊巴比妥麻醉下完整切下膽囊，觀察成石情況，計(jì)算各組成石率，如表1所示。術(shù)前動(dòng)物禁食12小時(shí)。