[發(fā)明專利]一種人源性細(xì)胞因子生發(fā)制劑及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710093074.4
• 申請(qǐng)日: 2007-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101199837A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧國(guó)宏;伍津津;何蔭良;譚文婷;岳世韜;高小燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 何蔭良
• 主分類號(hào): A61K38/19
• 分類號(hào): A61K38/19;A61K9/19;A61K47/24;A61P17/14;A61K35/12;A61K35/36;A61K35/50
• 代理公司: 重慶市恒信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 劉小紅

1.一種人源性細(xì)胞因子生發(fā)制劑，其特征是其成分包括脂質(zhì)成膜材料卵磷脂、膽固醇及活性成分生發(fā)細(xì)胞因子，它們之間的重量份數(shù)比為：2～6∶1～4∶1～5；所述卵磷脂選自卵黃卵磷脂或大豆卵磷脂；所述生發(fā)細(xì)胞因子選自人的成纖維細(xì)胞、胎盤(pán)細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞或毛乳頭細(xì)胞的培養(yǎng)上清液的蛋白凍干粉末；所述生發(fā)細(xì)胞因子被包封在脂質(zhì)膜中。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人源性細(xì)胞因子生發(fā)制劑，其特征是所述人源性細(xì)胞因子生發(fā)制劑為脂質(zhì)體凍干粉末劑型。

3.一種制備如權(quán)利要求1所述人源性細(xì)胞因子生發(fā)制劑的制備方法，其特征是：工藝包括以下步驟：

(1)采用飽和硫酸銨分級(jí)沉淀法至硫酸銨飽和度達(dá)70％來(lái)濃縮培養(yǎng)上清液，透析除鹽，-70℃冰凍干燥濃縮液，獲得富含與毛發(fā)生長(zhǎng)有關(guān)的細(xì)胞因子的蛋白凍干粉末。其主要活性成分為：肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)。細(xì)胞可以是成纖維細(xì)胞、胎盤(pán)細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞或毛乳頭細(xì)胞；

(2)將卵磷脂和膽固醇用氯仿和甲醇按2∶1體積配比溶解，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上于48℃、120r/min條件下旋轉(zhuǎn)蒸除溶劑，得黃綠色乳狀脂膜；

(3)稱取步驟(1)的蛋白凍干粉末，用PBS?PH7.4溶解，加入步驟(2)所得脂膜中，并加入乙醚混勻，在超聲波清洗器上于20℃、160W條件下超生振蕩乳化10min，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上于38℃、120r/min條件下旋轉(zhuǎn)蒸除溶劑，至凝乳/豆腐樣凝膠形成；

(4)用PBS?PH7.4混懸步驟(3)所述凝膠，靜置1h，然后在超聲破碎儀上于冰浴、150W條件下，間歇超聲乳化，得乳白色乳液，過(guò)濾除殘?jiān)?，收集濾液；

(5)將步驟(4)所得濾液于-70℃冰凍干燥24h，即得富含細(xì)胞因子活性成分的脂質(zhì)體凍干粉末。