[發明專利]水蘇糖含量快速檢測技術

無效

• 申請號: 200710092865.5
• 申請日: 2007-10-22
• 公開（公告）號: CN101419198A
• 公開（公告）日: 2009-04-29
• 發明（設計）人: 向志剛;張梅;黃傳維;胥紅衛
• 申請（專利權）人: 重慶新禹投資（集團）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及水蘇糖快速檢測技術。具體講涉及通過高效液相色譜技術(HPLC)對水蘇糖提取原料中的水蘇糖含量進行快速檢測的技術。涉及化學檢測技術領域。

背景技術

水蘇糖(Stachyose)屬于棉子糖屬半乳糖苷類非還原性功能性低聚糖。它能顯著促進雙歧桿菌增殖，被譽為“超強雙歧因子”；另外，水蘇糖還能促進腸內短鏈脂肪酸的增加，降低腸內pH值，維持腸道內微生態平衡，抑制病原腐敗菌的生產，并能促進腸道對鈣、鎂等微量元素的吸收；它還兼有調節免疫、降血糖和降血脂(膽固醇)功能；還可做低甜度的甜味劑和營養物質。水蘇糖物化性質穩定和生理功能廣泛，且經毒理學實驗證實安全可靠，可廣泛應用于醫藥保健、食品、化妝品、飲料、酒、飼料類等領域中，開發潛力巨大。

提取水蘇糖的主要工業原料為大豆、草石蠶、地靈等，水蘇糖在不同植物中含量差別較大，大豆中水蘇糖含量一般為5％-8％；草石蠶中水蘇糖含量為10％-15％；地靈中水蘇糖含量為20％-40％。不同栽培條件和地理環境水蘇糖含量差別也較大。

水蘇糖含量快速檢測在水蘇糖產業化開發中具有重要價值和應用意義，水蘇糖生產企業與水蘇糖原料生產企業或農戶合作時，目前沒有準確、快速的檢測技術，收購價格難以確定，限制了產業的發展，

目前水蘇糖快速檢測技術研究在國內外尚屬空白，一些生產企業采用棉子糖的檢測技術，由于水蘇糖與棉子糖結構上的不同，HPLC檢測的色譜條件存在較大差異，造成檢測結果不可靠。

發明內容

本發明的目的是建立水蘇糖高效液相色譜(HPLC)快速檢測技術。

本發明的內容包括以草石蠶為原料，通過索氏提取法快速提取水蘇糖，確定高效液相色譜技術的色譜條件，建立水蘇糖快速檢測技術體系。

本發明建立水蘇糖快速檢測技術體系，檢測時間短，結果可靠，是適于水蘇糖生產企業檢測原料中水蘇糖含量的成熟技術。

(1)從草石蠶中提取水蘇糖的索氏提取條件為：70％乙醇于65℃-85℃水浴，索氏提取提取時間為2.5-4h。

(2)HPLC檢測色譜條件為：色譜柱：Agilent?Eclipse?XDB?C8柱(5μm，4.6×150mm)；流動相為以下配方選基一：乙睛：醋酸緩沖液＝23：77；乙睛：醋酸緩沖液＝30：70；乙睛：醋酸緩沖液＝25：75；溫度：25-35℃；流速：1-2mL/min；波長：260nm。

本發明解決技術問題的方案分以下三個步驟完成：

(1)草石蠶中水蘇糖索氏提取：稱取100g草石蠶鮮樣，研碎，將樣品裝入濾紙套筒中，把套筒小心地插入索氏提取器中，取300mL?70％乙醇加入600mL平底燒瓶中，加入幾粒沸石。水浴加熱65℃-85℃，連續提取2.5-4h后，提取液顏色較淡，待溶液剛剛虹吸流回燒瓶時，立即停止加熱，收集提取液，以鹽酸中和。

(2)樣品提純：提取液加熱至70℃后經2％(w/v)活性炭脫色，攪拌30min，靜置后以3?000r/min離心10min后收集上清液，再用1/5體積的10％三氯乙酸除蛋白，以3?000r/min離心去除變性蛋白，上清液真空蒸發濃縮。濃縮后的殘渣以200mL?70％乙醇沉淀，3?000r/min離心后取上清液真空濃縮至30mL。

(3)HPLC檢測：樣品處理方法：1％醋酸水溶液99mL，加入1ml濃縮液，攪拌混勻后，取20μL做HPLC分析。

具體實施方式：

在下面的實施例中進一步說明了本發明，這并不限制本發明的范圍。

實施例1