[發明專利]人臍血干細胞培養及定向分化為多巴胺能神經細胞的方法及得到的多巴胺能神經細胞的應用無效
| 申請號： | 200710090928.3 | 申請日： | 2007-03-21 |
| 公開（公告）號： | CN101054572A | 公開（公告）日： | 2007-10-17 |
| 發明（設計）人： | 季鳳清;楊慧;孫海梅;趙春禮;趙煥英 | 申請（專利權）人： | 首都醫科大學 |
| 主分類號： | C12N5/08 | 分類號： | C12N5/08;A61K35/30;A61P25/16 |
| 代理公司： | 北京康信知識產權代理有限責任公司 | 代理人： | 李丙林;阮偉 |
| 地址： | 100069北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 人臍血 干細胞 培養 定向 化為 多巴胺 神經細胞 方法 得到 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種由臍帶血干細胞定向分化為多巴胺(DA)能神經細胞的方法，包括以下步驟：
a)臍血干細胞培養：從臍帶血中分離臍帶血單個核細胞，將分離出的臍帶血單個核細胞接種在具有蓋玻片的多孔板中，置于36.5-37.5℃、3-8％的CO2、飽和濕度的培養箱中培養，得到培養后的臍血干細胞；
b)多巴胺能神經細胞的誘導分化：取生長狀態良好的臍血干細胞，待其生長至第12-16天達70％-90％融合時全量換液，使用條件培養液誘導劑進行誘導分化，得到多巴胺能神經細胞；
其中所述條件培養液誘導劑選自紋狀體條件培養液、星形膠質細胞條件培養液及羊膜上皮細胞條件培養液中的一種。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述多孔板在使用前先用多聚賴氨酸或鼠尾膠原處理。
3.根據權利要求1所述的方法，在培養箱中培養包括在5-8天首次全量更換培養液，以后根據細胞生長情況每2～3天半量換液一次。
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