[發(fā)明專(zhuān)利]可溶性CTLA4突變體分子及其應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710084079.0
• 申請(qǐng)日: 2001-05-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101255192A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: R·J·皮奇;J·R·奈穆拉;P·S·林斯利;J·巴約拉斯
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 布里斯托爾－邁爾斯斯奎布公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/705
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/705;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N15/79;A61K38/16;A61P37/02
• 代理公司: 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司
• 代理人: 梁謀

1.?一種融合蛋白，其包含在以下區(qū)段具有一個(gè)或多個(gè)突變的CTLA4細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域：

i)始于+25位的絲氨酸、止于+33的精氨酸的氨基酸序列(S25-R33)；和/或

ii)始于+97的蛋氨酸、止于+107的甘氨酸的氨基酸序列(M97-G107)。

2.?權(quán)利要求1的融合蛋白，其中所述突變?yōu)橐韵掳被岬娜〈篠25、A29、T30、E31、R33、Y103、L104和G105。

3.?權(quán)利要求2的融合蛋白，其中所述氨基酸取代選自L(fǎng)104E和L104D。

4.?權(quán)利要求2的融合蛋白，其中所述氨基酸取代選自L(fǎng)104EA29L、L104EA29W和L104EA29T。

5.?權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的融合蛋白，其還包含CTLA4細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的溶解性、親和性或效價(jià)改變的氨基酸序列。

6.?權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的融合蛋白，其還包含免疫球蛋白部分。

7.?權(quán)利要求6的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分為免疫球蛋白恒定區(qū)或其部分。

8.?權(quán)利要求7的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白恒定區(qū)包括免疫球蛋白分子的鉸鏈區(qū)、CH2區(qū)和CH3區(qū)。

9.?權(quán)利要求7或8的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白恒定區(qū)或其部分為人或猴免疫球蛋白恒定區(qū)或其部分。

10.?權(quán)利要求6-9任一項(xiàng)的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包含一個(gè)或多個(gè)降低效應(yīng)子功能的突變。

11.?權(quán)利要求6-10任一項(xiàng)的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包含鉸鏈區(qū)而且鉸鏈區(qū)中任一或所有半胱氨酸殘基被絲氨酸取代。

12.?權(quán)利要求11的融合蛋白，其中+130位的半胱氨酸被絲氨酸取代，+136位的半胱氨酸被絲氨酸取代，+139位的半胱氨酸被絲氨酸取代，如圖8或9所示。

13.?權(quán)利要求7-12任一項(xiàng)的融合蛋白，其中所述人免疫球蛋白恒定區(qū)發(fā)生突變后包含了以下突變：+130位的半胱氨酸被絲氨酸取代；+136位的半胱氨酸被絲氨酸取代；+139位的半胱氨酸被絲氨酸取代；+148位的脯氨酸被絲氨酸取代，如圖8或9所示。

14.?權(quán)利要求6-13任一項(xiàng)的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包括始于+126位的谷氨酸、止于+357位的賴(lài)氨酸的氨基酸序列，如圖8或9所示。

15.?權(quán)利要求6-14任一項(xiàng)的融合蛋白，其還包含位于止于+124位天冬氨酸的氨基酸序列和免疫球蛋白部分之間的接點(diǎn)氨基酸殘基。

16.?權(quán)利要求15的融合蛋白，其中所述接點(diǎn)氨基酸殘基是谷氨酰胺。

17.?權(quán)利要求1的融合蛋白，其包含如圖8所示的始于+1位蛋氨酸、止于+357位賴(lài)氨酸的氨基酸序列，或者如圖8所示的始于-1位丙氨酸、止于+357位賴(lài)氨酸的氨基酸序列。

18.?權(quán)利要求1-17任一項(xiàng)的融合蛋白，其還包含允許分泌所述融合蛋白的氨基酸序列。

19.?權(quán)利要求18的融合蛋白，其中所述氨基酸序列包括制癌蛋白M信號(hào)肽。

20.?權(quán)利要求1-19任一項(xiàng)的融合蛋白，其與結(jié)合CD86的解離率低于野生型CTLA4。

21.?權(quán)利要求1-20任一項(xiàng)的融合蛋白，其是可溶的。

22.?一種核酸分子，其包含編碼對(duì)應(yīng)于權(quán)利要求1-21任一項(xiàng)的融合蛋白的氨基酸序列的核苷酸序列。

23.?權(quán)利要求22的核酸分子，其包含如圖8所示的始于-3核苷酸位的胍、止于+1071核苷酸位的腺嘌呤的核苷酸序列，或者包含如圖8所示的始于+1核苷酸位的腺嘌呤、止于+1071核苷酸位的腺嘌呤的核苷酸序列。

24.?一種核酸分子，其包含權(quán)利要求23的核酸分子的一部分，其中所述部分編碼所述融合蛋白的完整細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。

25.?一種載體，其包含權(quán)利要求22-24任一項(xiàng)的核酸分子的序列。