[發(fā)明專利]煙草NaN3誘變種質(zhì)創(chuàng)新與品種選育技術(shù)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710077966.5
• 申請日: 2007-10-09
• 公開（公告）號: CN101133715A
• 公開（公告）日: 2008-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 任學(xué)良;李繼新;王軼
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省煙草科學(xué)研究所
• 主分類號: A01H1/06
• 分類號: A01H1/06;A01H1/04;A01C1/00;A01G1/00
• 代理公司: 貴陽中工知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 劉安寧

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及處理種子的方法，具體來說，涉及煙草種質(zhì)創(chuàng)新和品種選育技術(shù)。

技術(shù)背景

自從1948年，Gustafsson等曾用芥子氣處理大麥獲得突變體；1967年Nilan用硫酸二乙酯處理大麥種子育成了矮稈、高產(chǎn)品種，此后化學(xué)誘變劑的研究和應(yīng)用就逐步發(fā)展起來。與物理誘變劑相比，化學(xué)誘變劑的特點有：①誘發(fā)突變率較高，而染色體畸變較少；②對處理材料損傷輕，有的化學(xué)誘變劑只限于DNA的某些特定部位發(fā)生變異；③大部分有效的化學(xué)誘變劑較物理誘變劑對生物損傷大，容易引起生活力和可育性下降。在通過化學(xué)誘變培育植物新品種方面，已經(jīng)有技術(shù)方案申請了專利，例如中國專利申請件ZL02136506.7號“純天然彩色草坪草的培育方法”用疊氮化鈉進(jìn)行種子直接誘變或離體誘變處理，培育了彩色草坪草；01139096.4號“生物工程改良水稻品質(zhì)的方法”用化學(xué)誘變劑EMS+NEU處理稻種，改良了水稻品質(zhì)；200410053947.5號“一種帶有葉色標(biāo)記玉米的選育方法”用疊氮化鈉或甲基磺酸乙酯處理玉米種子，誘變得到帶有葉色標(biāo)記的玉米；200510043191.0號“一種辣椒苗期黃苗性狀植株的獲得方法”用亞硝酸溶液浸泡辣椒種子，得到黃苗性狀植株等。但迄今為止，采用化學(xué)誘變方法處理煙草種子的技術(shù)尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供煙草NaN₃誘變種質(zhì)創(chuàng)新與品種選育技術(shù)，選擇NaN₃作為實用的誘變劑，并將這一誘變率高而安全的誘變劑高效地應(yīng)用于煙草品種選育。

發(fā)明人通過長期的試驗研究，認(rèn)識到，與物理誘變比較，化學(xué)誘變劑對人體更具有危險性，必須選擇不影響操作人員健康的有效物質(zhì)作為誘變劑。通過篩選，找到NaN₃作為一種動植物的呼吸抑制劑，可使復(fù)制中的DNA堿基發(fā)生替換，具有較高的突變頻率，又具有高效、無毒、價格便宜及使用安全等優(yōu)點，是目前為數(shù)不多的誘變率高而安全的一種誘變劑。

本發(fā)明提供的煙草NaN₃誘變種質(zhì)創(chuàng)新與品種選育技術(shù)，是一個完整的技術(shù)體系，它包括：

(1)誘變材料選擇

選擇綜合性狀較好、優(yōu)質(zhì)適產(chǎn)，以及適應(yīng)性較強(qiáng)，需要對個別不良性狀進(jìn)行改良的優(yōu)異栽培常規(guī)種或雜交種；

(2)配制NaN₃溶液

將4.11ml?0.2M磷酸氫二鈉和15.89ml?0.1M檸檬酸混合，配制成pH＝3的檸檬酸-磷酸氫二鈉溶液。其中0.1M檸檬酸以一個結(jié)晶水的檸檬酸21.01g配制1000ml水溶液；0.2M磷酸氫二鈉以35.01g二水磷酸氫二鈉配制1000ml水溶液；再將0.26g?NaN₃溶于1L中pH＝3的檸檬酸-磷酸氫二鈉溶液，配制成4mmol/L的NaN₃溶液。

(3)種子處理

所選材料的風(fēng)干種子在盛有50％甘油一水溶液的干燥器中平衡7d后，在溫度為25℃的恒溫箱內(nèi)用清水預(yù)浸24h，然后用4mmol/L的NaN₃溶液在25℃下處理6h，處理過的種子在流水中沖洗8h后，獲得M₁代種子；處理的種子數(shù)應(yīng)為10000粒以上。

(4)誘變煙草的種植、選擇與管理

將上述處理過的M₁代種子進(jìn)行播種、育苗、移栽、培植、開放授粉，并收種得到誘變二代(M₂)種子，再次進(jìn)行播種、育苗、移栽、培植，開花授粉，并收種得到下一代種子，如此反復(fù)種植并對第二、第三、第四代的植株進(jìn)行選擇，株系穩(wěn)定后，對于連續(xù)兩年優(yōu)良品系比較試驗綜合性狀均超過或接近對照的材料，可提交區(qū)域試驗，進(jìn)入品種審定程序。