[發(fā)明專利]花楸離體繁殖的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710072700.1 | 申請日: | 2007-08-24 |
| 公開(公告)號: | CN101103702A | 公開(公告)日: | 2008-01-16 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 沈海龍;王愛芝;楊玲 | 申請(專利權(quán))人: | 東北林業(yè)大學(xué);沈海龍;王愛芝;楊玲 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;C12N5/04 |
| 代理公司: | 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 單軍 |
| 地址: | 150040黑龍*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 花楸離體 繁殖 方法 | ||
1.花楸離體繁殖的方法,其特征在于花楸按以下步驟離體繁殖:一、將經(jīng)過消毒的花楸胚接種到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的MS固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)30~40天形成不定芽;二、將不定芽轉(zhuǎn)移到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的MS固體培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng),至形成微枝;三、將微枝或繼代培養(yǎng)的微枝剪切成長度為1~3cm、帶有腋芽或頂芽的莖段,然后接種到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的WPM培養(yǎng)基上培養(yǎng)至腋芽或頂芽的長度為≥1cm的無根苗;四、將無根苗轉(zhuǎn)入每升加入0.1~0.5mg生長激素、pH值為5.5~6.0、無機(jī)鹽濃度為1/2的MS固體培養(yǎng)基,并在每天光照時間為16~18h,溫度為25~30℃,濕度為60~80%的條件下培養(yǎng)誘導(dǎo)生根,即得到花楸再生植株;其中步驟四中的生長激素為奈乙酸或吲哚-3-丁酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟一中的花楸胚為成熟的花楸胚或幼嫩的花楸胚。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于還包括步驟五將根系發(fā)達(dá)的再生植株移栽到由泥炭土和砂子按2∶1的體積比混合而成的馴化基質(zhì)中,在溫度為25~30℃,濕度>80%的條件下馴化培養(yǎng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟五中馴化基質(zhì)的含水量為60%~80%。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟五中先洗掉再生植株根系上的培養(yǎng)基再移栽到馴化基質(zhì)中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟三中用繼代培養(yǎng)了3~4代的微枝剪切成長度為1.5~2.8cm、帶有腋芽或頂芽的莖段后接種到WPM培養(yǎng)基上長成無根苗。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟二繼代培養(yǎng)中每隔3~4周更換一次培養(yǎng)基。
8.花楸離體繁殖的方法,其特征在于花楸按以下步驟離體繁殖:一、將經(jīng)過消毒的花楸胚接種到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的MS固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)30~40天形成不定芽;二、將不定芽轉(zhuǎn)移到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的MS固體培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng),至形成微枝;三、將微枝或繼代培養(yǎng)的微枝剪切成長度為1~3cm、帶有腋芽或頂芽的莖段,然后接種到每升加入0.5~1.0mg?6-芐基氨基嘌呤和0.05~0.1mg奈乙酸、pH值為5.5~6.0的WPM培養(yǎng)基上培養(yǎng)至腋芽或頂芽的長度為≥2cm無根苗;四、將無根苗剪切下來,再將剪出的新茬口插入由草炭土、蛭石、珍珠巖按5∶4∶1的體積比混合而成的生根基質(zhì)中,基質(zhì)含水量為60%~80%、在溫度為25~30℃,濕度為60~80%的條件下馴化培養(yǎng)3~4周,即得到花楸再生植株;其中步驟四在生根基質(zhì)中拌入菌蟲雙殺,每立方米生根基質(zhì)中菌蟲雙殺的用藥量為2~5克。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟四每立方米生根基質(zhì)中菌蟲雙殺的用藥量為3~4克。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的花楸離體繁殖的方法,其特征在于步驟四中馴化培養(yǎng)是先將蓋在無根苗上方的培養(yǎng)盒蓋一端支起1/4高度培養(yǎng)一周,再將培養(yǎng)盒蓋一端支起1/2高度培養(yǎng)一周,然后將培養(yǎng)盒蓋一端支起3/4高度培養(yǎng)一周,之后將培養(yǎng)盒蓋撤去繼續(xù)培養(yǎng)一周。
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