[發(fā)明專利]益生菌高密度培養(yǎng)過程中的化學(xué)去脅迫技術(shù)

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710071690.X
• 申請日: 2007-01-26
• 公開（公告）號: CN101230323A
• 公開（公告）日: 2008-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙新淮;李丹
• 申請（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/23
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發(fā)明專利名稱為益生菌高密度培養(yǎng)過程中的化學(xué)去脅迫技術(shù)，是對益生菌高密度培養(yǎng)的一種簡便、實用增菌技術(shù)進行保護。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的益生菌，是嗜酸乳桿菌(L.acidophillus)或兩歧雙歧桿菌(B.bifidum)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化學(xué)去脅迫技術(shù)，是利用堿性鹽——檸檬酸鈉或者碳酸鈣來消除發(fā)酵過程所產(chǎn)生的乳酸對嗜酸乳桿菌所具有的脅迫作用，或者是利用抗氧化劑——異抗壞血酸和抗壞血酸來消除溶氧對兩歧雙歧桿菌所具有的脅迫作用。它們的添加方法主要是采用發(fā)酵前加入，也可以根據(jù)它們的性質(zhì)特征，在發(fā)酵中期加入。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的各類化合物的添加水平各有不同。對于嗜酸乳桿菌，各種化合物的添加方式分別是：發(fā)酵前加入碳酸鈣5g·L^-1，或加檸檬酸鈉液至pH6.9；發(fā)酵中期加入檸檬酸鈉液至pH5.9。對于歧雙歧桿菌，發(fā)酵前加入異抗壞血酸和抗壞血酸3.2g·L^-1或者1.6g·L^-1。添加這些化學(xué)物質(zhì)后，益生菌活菌體增加倍數(shù)相比于對照樣可以達到2～4倍。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述，在進行益生菌的高密度培養(yǎng)時，其大致技術(shù)方法與條件為：

(1)嗜酸乳桿菌的高密度培養(yǎng)方法1

1)配制1.6L的12％脫脂乳培養(yǎng)基。

2)在培養(yǎng)基中添加20％的檸檬酸鈉溶液或者是碳酸鈣固體。如果是加入檸檬酸鈉溶液，則至培養(yǎng)基pH至6.9；如果是加入碳酸鈣固體，則加入量選擇為5g·L^-1。

3)脫脂乳培養(yǎng)基按照115℃×15min的滅菌條件進行滅菌處理。

4)按2％的量接種嗜酸乳桿菌，在發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)。

5)培養(yǎng)條件為37℃、攪拌速度為100r·min^-1，培養(yǎng)時間為19h。

(2)嗜酸乳桿菌的高密度培養(yǎng)方法2

1)配制1.6L的12％脫脂乳培養(yǎng)基，按照115℃×15min的滅菌條件進行滅菌處理。

2)按2％的量接種嗜酸乳桿菌，在發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)。

3)培養(yǎng)條件為37℃、攪拌速度為100r·min^-1，總培養(yǎng)時間為19h。

4)培養(yǎng)8h時，向培養(yǎng)基中添加滅菌的20％檸檬酸鈉溶液，至培養(yǎng)基的pH為5.9。

(3)兩歧雙歧桿菌高密度培養(yǎng)方法

1)配制1.6L的12％脫脂乳培養(yǎng)基。

2)向培養(yǎng)基中添加異抗壞血酸鈉或是抗壞血酸鈉，加入量分別達到3.2g·L^-1或者是1.6g·L^-1，按照115℃×15min的滅菌條件進行滅菌處理。

3)按5％的接種量接種兩歧雙歧桿菌，在37℃、100r·min^-1條件下培養(yǎng)24h。