[發明專利]一種井岡霉素提取的方法

有效

• 申請號: 200710071123.4
• 申請日: 2007-09-14
• 公開（公告）號: CN101139374A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發明（設計）人: 鄭裕國;沈寅初;薛亞平;陳小龍
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07H15/22
• 分類號: C07H15/22;A01N63/02;A01P3/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司
• 代理人: 黃美娟;袁木棋

技術領域

本發明涉及井岡霉素的提取方法，特別涉及一種用超大網陽離子吸附樹脂提取井岡霉素的方法。

背景技術

井岡霉素是我國由沈寅初院士等人自主開發并生產的農用抗生素，由吸水鏈霉菌井岡變種(Streptomyces?hygroscopicus?var.jinggangensis?yen)代謝產生，能有效抑制水稻紋枯病菌，具有毒性低、藥效長、無抗性、活力穩定等優點，經過多年發展，已成為我國生物農藥的十分重要的品種，對我國水稻的高產穩產優質作出了重大貢獻，對農業生產乃至國民經濟有十分重要的作用。現已成為我國產量最大、發酵單位最高的抗生素之一，井岡霉素A的發酵效價已經提到30000μg/ml以上，已發展成為引人注目的生物技術重要產業。

井岡霉素是多元混合物，主要由井岡霉素A、B、C、D、E、F(結構如下圖所示)等組分組成，其中A組分對水稻紋枯病的活性最強，C和D組分幾乎無效，且在井岡霉素的組分中，井岡霉素A占70％多，井岡霉素B占20％左右，其它組分都比較少。

井岡霉素組分和結構

分析井岡霉素A的結構可以發現，井岡霉素A是由氨基環醇類化合物構成。用微生物酶解的方法，裂解井岡霉素的C-N鍵，生產井岡霉烯胺(有效霉烯胺)，再通過化學合成技術可以生產井岡霉醇胺。井岡霉醇胺是合成新一代降糖藥——伏格列波糖的關鍵中間體。

生物催化法裂解井岡霉素的C-N鍵生產井岡霉醇胺，需要高純度井岡霉素粉劑作為底物。另外，高純度井岡霉素粉劑也是生物農藥的高端新品種，符合環保、綠色和可持續發展的要求，可以有效提高原有低純度井岡霉素產品的附加值，打開國際市場。

在井岡霉素發酵液中，除了含量井岡霉素組分外，還含量大量的雜質，生物細胞及其碎片、殘糖、雜蛋白、無機鹽、色素等，傳統的井岡霉素粉劑生產工藝為：發酵液經預處理，再過濾，通過濃縮，然后真空烘干而得。因此得到的粉劑效價較低，含有殘糖、蛋白質等其他物質。顏色深，有效組分井岡霉素A含量低，產品質量低，不能滿足下游產品開發的需要，也不符合井岡霉素產品出口的質量要求，長期以來無法打開國際市場。

鄭裕國等(農藥，1996，35(11)：9~10)報道了使用凝膠離子交換樹脂來提取分離發酵液中的井岡霉素，發酵液預處理后，先經過強堿性陰離子交換樹脂除去雜質，然后用強酸樹脂凝膠樹脂吸附井岡霉素，得到了高純度的井岡霉素產品，但存在工藝流程長、吸附量低、解吸時間長，廢水排放量大、成本高等問題。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術提取中的存在工藝流程長、吸附量低、解吸時間長，廢水排放量大的缺點，提供一種工藝流程短，吸附量大的從井岡霉素發酵液中分離提井岡霉素的方法。

為實現發明目的，本發明通過利用超大網陽離子吸附樹脂從發酵液中分離提取出井岡霉素。

本發明所述的方法是將井岡霉素發酵液加熱至100～120℃，保溫5～60分鐘，這樣做一方面可以滅菌，另外一方面使發酵液中的蛋白質變性，保溫后再過濾，取濾液經過超大網陽離子吸附樹脂進行離子交換和吸附，然后用0.1～1.5mol/L的氨水溶液作為洗脫劑，對吸附有井岡霉素的超大網陽離子吸附樹脂洗脫，收集洗脫液經減壓蒸發除氨氣得含有井岡霉素A的水溶液，所述水溶液后處理制得井岡霉素。

井岡霉素的發酵：使用的菌種為Streptomyces?hygroscopicus?var.Jinggangensis。發酵培養基組成(g/l)：90g玉米粉，40g大豆粉，5g酵母膏，0.1g?K₂HPO₄，在攪拌式或氣升式發酵罐中進行發酵，發酵溫度38～40℃，通氣量0.7～1.3vvm，發酵時間40～50h，即可得到井岡霉素發酵液。

本發明所指的超大網陽離子吸附樹脂具有比表面積大，選擇性高，吸附量大的特點，在膨脹狀態中仍然具有高而穩定的交聯，仍保持原有的孔結構。工業上，該類樹脂主要用于吸附廢水中的污染物(Reactive?&Functional?Polymers?35(1997)99～109)。井岡霉素A為弱堿性抗生素，在發酵液中同時存在著正離子和分子的形式，該類樹脂具有離子交換和吸附能力強等特點，同時利用該類樹脂的離子交換和吸附功能，對發酵液中的井岡霉素進行提取，然后利用噴霧干燥技術，可得到井岡霉素A含量達到60％以上的井岡霉素粉劑。大大提高了產品質量，降低成本，提供了一種節約用水，能耗，減少環境污染的超大網吸附樹脂從發酵液中提取分離井岡霉素的方法。