[發(fā)明專利]鮟鱇魚皮中硫酸皮膚素的提取純化方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710069959.0 | 申請日： | 2007-07-09 |
| 公開（公告）號： | CN101100688A | 公開（公告）日： | 2008-01-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張虹;廖文娟;張燕平 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江工商大學(xué) |
| 主分類號： | C12P19/04 | 分類號： | C12P19/04;A61P7/02;A61P29/00 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 | 代理人： | 馮子玲 |
| 地址： | 310035浙江省杭州*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 魚皮 硫酸 皮膚 提取 純化 方法 | ||
1.鮟鱇魚皮中硫酸皮膚素的提取與純化方法，其特征在于以下步驟：
①新鮮鮟鱇魚皮經(jīng)水洗后冷凍干燥，組織搗碎后得到干品原料；
②按干品原料與水的重量體積比為1∶20-1∶30計，在干品原料中加入蒸餾水，再加入木瓜蛋白酶與胰酶組成的復(fù)合酶，于50-75℃水浴加熱提取13-19小時，冷卻后離心，得到上清液為硫酸皮膚素粗提液；
③粗提液中加入固體氫氧化鈉，再加入硼氫化鈉，氫氧化鈉與硼氫化鈉在粗提液的終濃度分別為0.5mol/L與0.1mol/L，于30-50℃水浴反應(yīng)20-30小時，離心取上清液，用醋酸調(diào)上清液PH值至6.5-7.0；
④加入體積為上清液體積1/3的除蛋白液，該除蛋白液組成按體積比為：正丁醇∶三氯甲烷1∶2.5-1∶4.5，充分搖晃15-30分鐘后，室溫靜置分層，去除下層液體，保留上層清液；
⑤將上層清液按以上步驟④重復(fù)操作4次，得到去除蛋白液體；
⑥去除蛋白液體加入兩倍體積乙醇，于4℃靜置一天，收集沉淀；
⑦將沉淀充分溶于水，離心除去不溶成分，水溶液采用分子量為14000的透析袋除去離子及小分子物質(zhì)，冷凍干燥后得到純化的硫酸皮膚素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述鮟鱇魚皮中硫酸皮膚素的提取與純化的方法，其特征為步驟②中的復(fù)合酶的加入量為干品原料重量的1.0-3.5％，復(fù)合酶中木瓜蛋白酶與胰酶的重量組成比為1∶1-1∶3。
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