[發明專利]制備凍干基因工程菌感受態細胞的生產工藝及保護劑配方

無效

• 申請號: 200710064325.6
• 申請日: 2007-03-12
• 公開（公告）號: CN101264062A
• 公開（公告）日: 2008-09-17
• 發明（設計）人: 袁紅杰;王翰斌;王翰騰
• 申請（專利權）人: 袁紅杰;王翰斌;王翰騰
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K47/42;A61K48/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.?一種凍干的感受態粉劑，其特征在于將冷凍干燥技術與基因工程菌感受態細胞的制備工藝相結合，得到一種凍干的感受態粉劑的基因工程菌感受態細胞制備方法。

2.?權利要求1的制劑，是凍干粉劑，其中所述該制品生產過程無菌操作、低溫、真空、干燥，所得制劑能以固體形式，在介于-20℃～4℃寬溫度范圍內穩定保存一段時期仍維持高轉化效率，便于貯存和運輸。

3.?權利要求1的制劑，其特征在于由液體溶液制成可貯藏的粉針劑時使其在-20℃條件下保藏一年轉化活性損失低于30％。

4.?權利要求1的制劑，由藥學上可以接受的凍干保護劑組成，其特征在于：其中的凍干保護劑由選自明膠、脫脂牛奶、右旋糖苷、海藻糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇其中之一或任意組合的物質和水制成。

明膠：??????????0.001％～2％或脫脂牛奶：0.5％～50％

右旋糖苷：??????0.1％～20％

海藻糖或蔗糖：??0.1％～20％

山梨醇或甘露醇：0.1％～20％

其余為水

5.?權利要求1的制劑，其中的凍干保護劑由選自明膠、脫脂牛奶、右旋糖苷、海藻糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇其中之一或任意組合的物質和水制成。

明膠：??????????0.01％～1％或脫脂牛奶：10％～20％

右旋糖苷：??????3％～10％

海藻糖或蔗糖：??3％～8％

山梨醇或甘露醇：3％～8％

其余為水

6.?權利要求1的制劑，其中的凍干保護劑各組分之間的重量配比如下：

明膠：????????0.1％

右旋糖苷：????8％

海藻糖：??????5％

山梨醇：??????5％

其余為水

7.?權利要求1的制劑，其中的凍干保護劑各組分之間的重量配比如下：

明膠：????????0.05％

右旋糖苷：????6％

海藻糖：5％

甘露醇：5％

其余為水

8.?權利要求4的保護劑的制備方法，其特征在于，經過以下步驟：

a?稱取適量明膠1g，室溫放置5分鐘，40℃水浴條件下攪拌，使其分散均勻，90℃下用活性炭吸附處理30分鐘。

b?稱取右旋糖苷、海藻糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇或它們的任意組合各適量，加熱溶化后加入0.8％的活性炭90℃下吸附處理30分鐘。

c?用0.45μM微孔濾膜過濾上述混合溶液，混合均勻后用注射用水定容，115℃高壓滅菌20分鐘。冷卻后無菌條件下分裝備用。

9.?權利要求1的制劑的生產工藝，細胞的群體生長通過控制種子培養狀態和放大培養的溫度、通氣量和培養時間來控制。搖瓶的轉數控制在200～300rpm；細胞的培養時間可通過監控溶氧來完成，細胞經過轉種放大培養一段時間通過檢測紫外可見分析儀檢測OD550在0.5～0.8之間；感受態細胞的培養溫度范圍為20℃～30℃。

10.?權利要求1的制劑的生產工藝，搖瓶的轉數控制在275rpm；細胞經過轉種放大培養一段時間通過檢測紫外可見分析儀檢測OD550在0.65～0.75之間；感受態細胞的培養溫度為23℃。