[發明專利]雞痘病毒雙基因表達載體（PT7.5N）無效
| 申請號： | 200710062632.0 | 申請日： | 2007-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN101220375A | 公開（公告）日： | 2008-07-16 |
| 發明（設計）人： | 任濤;孫令辰;江經偉;郁宏偉;廖明 | 申請（專利權）人： | 華南農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/863 | 分類號： | C12N15/863;A61K31/7088;A61K48/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 | 代理人： | 劉長威 |
| 地址： | 510642廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 痘病毒 基因 表達 載體 pt7 | ||
【權利要求書】：
1.雞痘病毒雙基因表達載體，其具有SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列。
2.一種構建權利要求1所述表達載體的方法，其包括如下步驟：
1)以PET28a為模板，Kan+ori?F和Kan+ori?R為引物，擴增出PET28a的Kan+ori片段；以雞痘病毒DNA為模板，TK1?F和TK1+Not?1?R為引物，擴增出雞痘病毒TK1同源臂；連接Kan+ori片段和TK1同源臂，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒，得到pKan+ori+TK1?Not?1；
2)以PET28a為模板，P7.5LacZ?F和LacZ?R為引物，擴增出P7.5LacZ片段；線性化pKan+ori+TK1?Not?1并與P7.5LacZ片段連接，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒得到pKan+ori+TK1?Not?1+P7.5LacZ；
3)以雞痘病毒DNA為模板，PolyA+TK2?F和TK2?R為引物，擴增出雞痘病毒TK2同源臂；線性化pKan+ori+TK1?Not1+P7.5LacZ并與TK2同源臂連接，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒，即得到雞痘病毒雙基因表達載體。
3.權利要求1所述的表達載體在真核表達中的應用。
4.權利要求1所述的表達載體在構建重組病毒基因疫苗中的應用。
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