[發明專利]雞痘病毒雙基因表達載體（PG7.5N）

有效

• 申請號: 200710062631.6
• 申請日: 2007-01-11
• 公開（公告）號: CN101220374A
• 公開（公告）日: 2008-07-16
• 發明（設計）人: 廖明;江經偉;孔令辰;郁宏偉;任濤
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N15/863
• 分類號: C12N15/863;A61K48/00;A61K31/7088
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 劉長威

1.雞痘病毒雙基因表達載體，其具有SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列。

2.一種構建權利要求1所述表達載體的方法，其包括如下步驟：

1)以PET28a為模板，Kan+ori?F和Kan+ori?R為引物，擴增出PET28a的Kan+ori片段；以雞痘病毒DNA為模板，TK1?F和TK1+Not?1?R為引物，擴增出雞痘病毒TK1同源臂；連接Kan+ori片段和TK1同源臂，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒，得到pKan+ori+TK1?Not?1；

2)以PET28a為模板，P7.5LacZ?F和LacZ?R為引物，擴增出P7.5LacZ片段；線性化pKan+ori+TK1?Not?1并與P7.5LacZ片段連接，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒得到pKan+ori+TK1?Not?1+P7.5LacZ；

3)以雞痘病毒DNA為模板，PolyA+TK2?F和TK2?R為引物，擴增出雞痘病毒TK2同源臂；線性化pKan+ori+TK1?Not1+P7.5LacZ并與TK2同源臂連接，轉化JM109感受態細胞，篩選出陽性菌落，擴大培養后抽提質粒，即得到雞痘病毒雙基因表達載體。

3.權利要求1所述的表達載體在真核表達中的應用。

4.權利要求1所述的表達載體在構建重組病毒基因疫苗中的應用。