[發明專利]轉基因細胞活化改性殼聚糖醫用敷料及制備方法及用途

無效

• 申請號: 200710058738.3
• 申請日: 2007-08-14
• 公開（公告）號: CN101125216A
• 公開（公告）日: 2008-02-20
• 發明（設計）人: 于德民;毋中明;張新歌;李蘭英;李朝興;宋丹;王鑫;鄭超;張紹敏;衛麗君
• 申請（專利權）人: 天津醫科大學代謝病醫院
• 主分類號: A61L15/40
• 分類號: A61L15/40;A61L15/28
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所
• 代理人: 陸藝

技術領域

本發明屬于基因工程、生物組織工程領域，特別是涉及一種轉基因細胞活化改性殼聚糖醫用敷料及制備方法及用途。

背景技術

糖尿病現已成為全世界的常見病和多發病，在發達國家被列為繼心血管疾病及腫瘤之后的第三大疾病。根據2006年國際糖尿病聯盟統計數字顯示，目前全球一億五千萬人患有2型糖尿病，但是其發病率在各地不一。我國大約有近3000萬糖尿病患者。按目前增長中的發病率來說，糖尿病將于數十年內成為全球最普遍的疾病之一。WHO預測到2025年全球糖尿病患者將達3.3億，其中有75％糖尿病患者在印度、中國等發展中國家。我國糖尿病患者的人數僅次于印度居世界第二位。糖尿病的危害不但在于其疾病本身，而且在于其各種急慢性并發癥，并且糖尿病已成為危及人類生存質量的罪魁禍首。

其中，糖尿病足部潰瘍是導致糖尿病患者截肢的主要原因。隨著全球糖尿病患者人數逐年增加以及人均壽命的延長，因糖尿病足部難愈性潰瘍而需要截肢的患者不斷增加。在美國現有1600萬糖尿病患者中，15％的患者可能在其一生中的某個階段出現足部潰瘍。調查表明，糖尿病患者每年足部潰瘍新發病率在2％-3％。每年大約25％糖尿病患者由于足部感染而住院治療，且非創傷性下肢截肢患者中至少50％是由糖尿病足部感染造成。由于糖尿病導致足部潰瘍發病率高，創面愈合慢，并發癥多，嚴重影響著患者的生活質量。因此，早期認識和正確處理該病具有重要臨床意義。

近年來，糖尿病導致的創面愈合障礙一直是國內外學者研究的重點。其發生機制涉及細胞代謝、免疫功能、生長因子和細胞供氧等多方面。

創面愈合這一復雜過程涉及了以下四個環節：穩定的內環境、炎癥反應、細胞增殖及重新塑型，包括炎癥細胞、修復細胞、細胞因子及細胞外基質的相互調節。在整個修復階段，生長因子的參與至關重要。生長因子是一組具有促進細胞生長、增殖、合成作用的蛋白質或多肽的專有名詞。它具有促進成纖維細胞大量增殖、膠原纖維明顯積累及增強創面抗張力的作用，增加內皮細胞和成纖維細胞的趨化性，使其遷移向受損部位，促進成纖維細胞產生膠原蛋白；能夠刺激血管內皮細胞、角質化細胞及成纖維細胞的增殖分化，加速血管化和再上皮化；它是炎癥細胞的有絲分裂原和趨化因子，而后者的聚集、脫粒則是創面修復的重要始動因素；此外，它還可調節細胞外基質的合成，共同促進潰瘍愈合。

對于某些難愈性創面，有學者認為是生長因子分散在細胞外基質中以及蛋白水解酶活性增強造成生長因子不足所致，所以在創面愈合過程中外源性補充某些生長因子，或通過增強內源性生長因子的活性，或上調生長因子受體的表達，以達到主動調控創面愈合的作用。然而將生長因子應用于創面改變局部微環境可促進創面愈合，但是也存在以下不足：生長因子半衰期較短；創面局部的蛋白水解酶活性較強，可分解大量生長因子；局部大劑量使用生長因子可能有副作用；生長因子以乳膏或鹽溶液作為載體會限制其生物利用度。為了克服這些不足，必然會大量重復使用生長因子，一方面造成醫療資源的浪費，另一方面容易產生耐藥性，從而導致生長因子不能充分發揮作用。

以血小板衍化生長因子(PDGF)為代表的生長因子在創傷修復的應用給糖尿病創面愈合帶來了突破性進展。PDGF是1974年由Ross等首先發現的，最初是從血小板中得到的，故稱為血小板衍化生長因子。但后來發現血小板以外的許多細胞如內皮細胞、巨噬細胞、血管平滑肌細胞等都能合成分泌PDGF或PDGF樣生長因子。PDGF作為一種多功能的細胞因子，與傷口愈合關系密切。在創面組織中，PDGF的含量及其生物活性變化通常會影響修復質量和修復后的組織改建。PDGF是重要的促有絲分裂原，能夠直接作用于成纖維細胞與角化細胞等組織修復細胞，縮短細胞周期，加速細胞增殖，促進傷口愈合。PDGF加速細胞增殖的機制可能與PDGF作為啟動因子誘導處于接觸抑制狀態的細胞進入細胞周期有關。一個靜止細胞(G0期細胞)進入細胞周期，必須經過啟動和推進兩個階段。在啟動因子如PDGF、堿性成纖維細胞與角化細胞生長因子等作用下，有關的啟動基因進行表達，為細胞進入S期積累物質和能量，然后在推動因子如表皮生長因子、轉化生長因子和胰島素樣生長因子-1等的作用下，細胞很快進入S期，加速細胞增殖。PDGF與推動因子的協同作用在體內和體外都已被證實。PDGF還可誘導成纖維細胞與角化細胞分泌胰島素樣生長因子-1，間接促進細胞增殖。另外，PDGF能夠促進纖維連接蛋白、聚葡萄糖胺和膠原等細胞外基質的合成和分泌，影響創面修復后組織的改建。