[發(fā)明專(zhuān)利]殺滅土壤線蟲(chóng)微生態(tài)菌制劑及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710058424.3
• 申請(qǐng)日: 2007-07-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101099492A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張清敏;崔合香;崔小會(huì);劉曼;吉雪瑩
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南開(kāi)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A01N63/02
• 分類(lèi)號(hào): A01N63/02;A01P5/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

生物技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明涉及一種殺滅土壤線蟲(chóng)微生態(tài)菌制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

目前我國(guó)的土壤生態(tài)系統(tǒng)已經(jīng)或正在受到嚴(yán)重破壞，土壤線蟲(chóng)顯著增多，植物病害的種類(lèi)和范圍不斷增加，這都是土壤生態(tài)系統(tǒng)遭到破壞的明證。其中土壤線蟲(chóng)是直接影響農(nóng)作物產(chǎn)量的土壤害蟲(chóng)，尤其是種植花生、紅薯的土壤，線蟲(chóng)可以把整塊整塊土地的花生、紅薯吃光或破壞，幾乎絕收。以前只是尋求化學(xué)殺蟲(chóng)劑，但其第一年有效，第二年則幾乎無(wú)效，而且它所造成的土壤污染幾十年都消除不掉。所以，研究開(kāi)發(fā)微生物制劑殺滅線蟲(chóng)勢(shì)在必行。國(guó)內(nèi)外已有一些研究，但是，還未見(jiàn)高密度、高活性，能大面積使用的微生態(tài)菌制劑的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是：提供一種高密度、高活性的殺滅土壤線蟲(chóng)微生態(tài)菌制劑及其制備方法。

本發(fā)明解決該技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：

以巨大芽孢桿菌(AS?1.217，Bacillus?megaterium)為主，輔以適量細(xì)黃鏈霉菌(AS4.891，Streptomyces?microflavus)，并吸附固定化于麥麩上制備成菌制劑。兩株菌種均購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院微生物研究所菌種保藏中心。

殺滅土壤線蟲(chóng)微生態(tài)菌制劑是上述巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌優(yōu)化組合的復(fù)合微生物組成，其中各組分的重量百分比為：巨大芽孢桿菌60％～80％，細(xì)黃鏈霉菌20％～40％。

殺滅土壤線蟲(chóng)微生態(tài)菌制劑的制備方法包括下述步驟：

1.將保存的各斜面菌種活化，分別搖瓶培養(yǎng)。巨大芽孢桿菌和細(xì)黃鏈霉菌都用可溶性淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基：pH7.0～7.5，121℃高壓滅菌20-30分鐘；巨大芽孢桿菌，35～40℃培養(yǎng)20～24小時(shí)；細(xì)黃鏈霉菌，28～30℃培養(yǎng)36～50小時(shí)。

2.用玉米淀粉培養(yǎng)基，一級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌；接種量5％～10％。

3.用玉米淀粉培養(yǎng)基，二級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌；接種量5％～10％。

4.以麥麩為載體分別固體擴(kuò)大培養(yǎng)并固定化于麥麩上。麥麩滅菌前加入10％玉米淀粉的培養(yǎng)液，固體擴(kuò)大培養(yǎng)條件：30～37℃，不斷攪拌并通入凈化的空氣。

5.將巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌經(jīng)30～45℃溫?zé)犸L(fēng)干燥，然后粉碎。

6.將吸附于麥麩上的巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌混合，各菌組分的重量百分比為：巨大芽孢桿菌60％～80％，細(xì)黃鏈霉菌20％～40％。

本發(fā)明的有益效果

1)復(fù)合菌固定化于麥麩上，使每克復(fù)合菌制劑的有效菌菌落數(shù)(CFU)可高達(dá)100個(gè)億，幾乎達(dá)到了最大可能數(shù)，至今還未見(jiàn)如此高含菌量菌制劑的報(bào)道.麥麩不僅能為所培養(yǎng)菌提供一些營(yíng)養(yǎng)成分，還由于其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，具有較大的比表面積，所以能在單位體積內(nèi)附著吸附固定化較多的菌體。所以，有效菌一旦施入土壤可以很快形成優(yōu)勢(shì)菌群，發(fā)揮殺滅線蟲(chóng)的作用，殺滅率接近100％。還有殺滅或驅(qū)除蠐螬(金龜子的幼蟲(chóng))的作用，殺滅率或驅(qū)除率達(dá)95％以上。

2)土壤線蟲(chóng)的腸壁細(xì)胞含有較多的幾丁質(zhì)，而巨大芽孢桿菌能分泌較多的幾丁質(zhì)酶。所以，土壤線蟲(chóng)一旦遇到巨大芽孢桿菌，由于其腸壁遭到巨大芽孢桿菌幾丁質(zhì)酶的破壞，最后必死亡。巨大芽孢桿菌還具有把土壤固定化的磷轉(zhuǎn)化為可溶性磷的作用，可溶性磷是植物和微生物可利用的磷。

細(xì)黃鏈霉菌，能產(chǎn)生抗生素抗病驅(qū)蟲(chóng)，分泌刺激素，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，轉(zhuǎn)化礦物質(zhì)。

二者相互配合，不僅殺蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)而且促進(jìn)、修復(fù)土壤生態(tài)系統(tǒng)平衡。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

按下列步驟進(jìn)行：

1)將4℃保存的各斜面菌種活化，分別搖瓶培養(yǎng)。巨大芽孢桿菌和細(xì)黃鏈霉菌都用可溶性淀粉培養(yǎng)基培養(yǎng)，具體配方如下：可溶性淀粉20g，KNO₃?1g，NaCl?0.5g，K₂HPO₄?0.5g，MgSO₄.7H₂O?0.5g，F(xiàn)eSO₄?0.01g，蒸餾水1000mL，pH7.2，121℃高壓滅菌20分鐘。巨大芽孢桿菌，37℃培養(yǎng)24小時(shí)；細(xì)黃鏈霉菌，30℃培養(yǎng)48小時(shí)。

2)一級(jí)液體擴(kuò)大培養(yǎng)(巨大芽孢桿菌與細(xì)黃鏈霉菌分別單獨(dú)擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基用玉米淀粉，培養(yǎng)條件同上)；接種量5％。

3)二級(jí)液體分別擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件同上；接種量5％。