[發明專利]利用菇渣發酵綠色木霉的生產工藝

無效

• 申請號: 200710057186.4
• 申請日: 2007-04-24
• 公開（公告）號: CN101063088A
• 公開（公告）日: 2007-10-31
• 發明（設計）人: 郝永娟;王正祥;王萬立;劉春艷;王勇;楊秀榮
• 申請（專利權）人: 天津市植物保護研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/885
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域本發明是一種生物菌劑的制備方法，屬于農業應用微生物技術領域。

背景技術

本發明專利是為解決目前化學農藥的頻繁應用，農藥殘留在蔬菜和土壤中不斷積累，而應用綠色木霉對多種真菌土傳病害具有明顯的預防作用。利用有機添加物為載體大量繁殖木霉菌株，進一步鞏固兩者的協同作用，不僅補充土壤養分，增強抑菌效果，而且可以提高拮抗菌在土壤中的生存繁殖能力，減少農藥在土壤中的殘留。

木霉菌對土傳病原菌的生物防治國內外已有大量報道，許多菌株田間生產防效并不理想，原因之一是直接引入客土的拮抗微生物不能很好地在土壤中定殖并成為優勢種群。有機添加物的施入在某種程度上起到“接種”作用，有機物本身已帶有大量微生物，其帶入的活性有機碳源又是微生物增殖的主要原因，因此利用有機添加物培養拮抗菌，不僅可以鞏固拮抗菌在土壤中的定殖，而且增強了抑菌效果。1991年Ophnob報道，把木霉制劑與有機肥同時施用，能使土壤微生物活性明顯提高。1999年劉瓊光報道利用拮抗細菌和土壤添加劑同時施入土壤對煙草青枯病的防治效果，顯著好于兩種單獨施用的效果。1994年上海農科院植保所周新根報道利用由蠶豆粉、無機鹽等制成的“MX”有機添加物，滅菌后分別培養三種拮抗菌株，1％的添加量對辣椒疫病、番茄立枯病、猝倒病具有很好的防效，顯著高于單用。在滅菌土壤中培養4周后拮抗菌的種群密度比單獨施用拮抗菌的處理高50-100倍，且拮抗菌存活時間較長。本研究擬采用一些土傳病害的拮抗木霉菌為拮抗菌株，利用合成有機物為載體大量繁殖。進一步鞏固兩者的協同作用，不僅補充土壤養分，增強抑菌效果，而且可以激活土壤原有拮抗菌的作用。

菇渣是生產食用菌后的下腳料，其含有較高的蛋白質和其他營養成分，可以為微生物生長提供良好營養，木霉菌是食用菌生產過程中主要的污染菌種，適宜其生長。同時發酵的菇渣可以作為肥料，改良土壤。因此采用菇渣生產木霉菌不僅可以降低生產成本，而且可以有效處理廢棄物，提高木霉菌對土傳病害的防治效果。

發明內容

本發明提供一種利用菇渣生產木霉菌劑的制備方法。包括對多種土傳病害具有較強的拮抗作用的綠色木霉菌。斜面菌種保存，平皿內活化培養，三角瓶液體發酵，種子罐混合發酵后，以菇渣、麥麩等吸附進行固體發酵，干燥后而制成本菌劑。

1.菌株??用于防治蔬菜土傳病害，從土壤中分離篩選的綠色木霉菌株(Trichoderma?viride，編號：Tr9801)。

2.原料處理：選擇無霉變的菇渣曬干后粉碎成80目粉狀備用。

3.液體發酵將斜面保存的菌種用PDA培養基活化，接種于500ml三角瓶內裝液體培養基100ml，26℃，180r振蕩培養，3～5d，為液體菌種。以10％(V/V)接種量加入種子發酵罐內發酵培養，發酵溫度25～28℃，通風攪拌，發酵72小時。液體培養基為：0.5～1％酵母粉，2～3％淀粉，1％豆漿，0.2～0.5％CaCO₃，0.03～0.05％KH₂PO₄，0.01～0.02％MgSO₄，PH為5.5～6.5。菌液導出時孢子含量10⁷～10⁸cfu/ml。

4.固體發酵高壓滅菌后，向固體培養基內加入3～5倍重量的孢子懸浮液，于25～28℃，培養7～10天。固體培養基：菇渣90.5％，麩皮5％，2％蔗糖，1％磷酸二氫鉀，1％硫酸鎂，0.4％碳酸鈣，0.1％尿素。

5.培養好的物料在低于50℃的條件下風干，粉碎，包裝。

本發明的木霉菌株對多種蔬菜的土傳病害如猝倒病、立枯病及枯萎病等具有很好的防治效果，對植株生長具有明顯的促進作用。利用菇渣為營養載體大量繁殖木霉菌株，進一步鞏固兩者的協同作用，不僅補充土壤養分，增強抑菌效果，而且可以提高木霉菌在土壤中的生存繁殖能力，且存活時間較長，減少農藥在土壤中的殘留。本發明的發酵工藝簡單，易于控制，成本低廉。

具體實施方式

原料處理：選擇無霉變的菇渣曬干后粉碎成80目粉狀備用。