[發(fā)明專利]一種具有抗肝炎病毒活性的生物堿類新化合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710056731.8
• 申請日: 2007-02-06
• 公開（公告）號: CN101239982A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張鐵軍;常軍;劉昌孝;田成旺
• 申請（專利權(quán)）人: 天津藥物研究院
• 主分類號: C07D491/04
• 分類號: C07D491/04;C12P17/18;C12R1/685;C07D211/00;C07D309/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及以獐牙菜苦苷為原料，通過與真菌Aspergillus?niger混合培養(yǎng)而代謝生成的一個(gè)新化合物，其骨架屬于生物堿類。本發(fā)明也涉及這個(gè)化合物的制備方法；本發(fā)明還涉及這個(gè)化合物在制備藥物方面的用途，特別是在制備抗肝炎藥物等領(lǐng)域。

背景技術(shù)

肝炎是世界上重大傳染性疾病，近年來呈逐漸上升趨勢。我國是肝炎大國，2006年全世界有3.5億乙肝病毒攜帶者，中國有近1.2億；丙肝病毒攜帶者1.7億，中國也有近2000萬。2000年全球約有200萬人死于與病毒有關(guān)的乙肝癌和晚期肝硬化，中國也有近30萬人死亡。藏茵陳來源于龍膽科(Gentianaceac)獐牙菜屬(Swertia)植物，該屬多種中藥、民族藥及民間藥均有長期治療肝炎的臨床背景。藏茵陳在治療肝炎后高膽紅素血癥、急性黃膽肝炎和慢性肝炎均取得了良好的效果。獐牙菜苦苷是藏茵陳中的一個(gè)主要的有效成分。對獐牙菜苦苷的代謝研究自20世紀(jì)八十年代以來已有報(bào)道，先后有紅百金花內(nèi)酯、龍膽寧堿等化合物被分離鑒定。我們在針對獐牙菜苦苷在真菌Aspergillus?niger中代謝研究中分離并鑒定了一個(gè)新的水溶性的化合物，藥效學(xué)研究表明以該化合物為主要組成的制劑具有良好的抗炎作用。針對該化合物，通過實(shí)驗(yàn)確定了合理的制備技術(shù)，利用該技術(shù)制備的產(chǎn)物可以使該化合物的含量高于70％。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種以獐牙菜苦苷為原料，通過代謝、分離制備一個(gè)新的化合物I：

化合物I命名為(4-(1-Methylaminpmethyl-vinyl)-5，6-dihydropyran-2-one)。分子組成：C₁₀H₁₂O₃N；分子量：195；紫外光譜UV：λmax：279.2nm。高分辨率質(zhì)譜：ESI-MS(int.rel)：194.2165(100，M+)，178.1823(81，[M+-CH3])，150.2017(62，[M+-CO2])，132.1857(12，[M+-CO2-H2O])，104.1323(51)，90.105(52)。核磁共振氫譜¹H?NMR(400MHz，CDCl₃)δ：3.41(2H，t，J＝6.0Hz，6-H2)，4.36(2H，t，J＝6.0Hz，7-H2)，7.42(1H，t，J＝7.7Hz，10-H)，7.87(1H，dd，J＝7.7Hz，J＝1.3Hz，8-H)，8.23(1H，dd，J＝7.7Hz，J＝1.3Hz，3-H)，10.3(1H，s，1-H)。核磁共振碳譜¹³C?NMR(CDCl₃，100MHz)δ：24.2(C-6)，66.6(C-7)，127.1(C-5)，127.8(C-10)，132.6(C-4)，135.8(C-3)，138.2(C-8)，141.0(C-9)，164.7(C-11)，191.5(C-1)。

依據(jù)上述理化性質(zhì)，結(jié)合二維核磁共振譜HMBC，HSQC和COSY，確證本化合物的結(jié)構(gòu)如下，即式(I)。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述化合物的制備方法，本發(fā)明的制備方法可以使該化合物的含量高于90％，包括以下步驟：

1、將獐牙菜苦苷溶液加入真菌Aspergillus?niger培養(yǎng)液中，使獐牙菜苦苷的最終濃度為0.5mg/ml，在37℃，160rpm下培養(yǎng)5天。培養(yǎng)液收集、過濾、減壓濃縮；

2、將上述濃縮液離心、上清液用石油醚萃取后，再用三氯甲烷或乙酸乙酯萃取3次，萃取液合并，回收溶劑至干；

3、將殘留物溶于水中，過濾得上清液，此上清液用于制備液相分離，制備液相條件為：流動相：A(0.04％甲酸/乙腈溶液)和B(0.04％甲酸/水溶液)；梯度條件為：0～10min?15％A，10～30min?15％A～24％A，30～40min?24％A～100％A。流速為20ml/min。制備液相分離接收液減壓濃縮、冷凍干燥，干燥物再經(jīng)一次制備液相制備，制備液相條件為：15％A等梯度。流速為20ml/min。接收液減壓濃縮、冷凍干燥，干燥得純度為98％的化合物(I)。

上述方法獲得的化合物(I)的含量大于98％。

制備含量為70％以上的方法如下：

1、將獐牙菜苦苷溶液加入真菌Aspergillus?niger中，使獐牙菜苦苷的最終濃度為0.5mg/ml，在37℃，160rpm下培養(yǎng)5天。培養(yǎng)液收集、過濾、減壓濃縮；