[發明專利]從烏頭屬中藥材中分離提取單雙酯型生物堿與脂型生物堿的方法

有效

• 申請號: 200710055977.3
• 申請日: 2007-08-21
• 公開（公告）號: CN101129500A
• 公開（公告）日: 2008-02-27
• 發明（設計）人: 劉志強;包懿;皮子風;越皓;宋鳳瑞;劉淑瑩
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: A61K36/714
• 分類號: A61K36/714;C07G5/00
• 代理公司: 長春科宇專利代理有限責任公司
• 代理人: 馬守忠

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，具體涉及從烏頭屬中藥材中分離提取單雙酯型生物堿與脂型生物堿的方法。

背景技術

中藥附子、川烏等烏頭屬中藥材是中醫臨床常用中草藥。其主要的藥理作用有：抗炎、鎮痛、強心、抗心肌缺血缺氧、影響血壓、防止休克等。另外，還對中樞神經系統、外周神經系統和免疫系統均有較強作用。經現代臨床藥理學證明附子中具有藥理活性的物質主要是生物堿類化合物。其生物堿的類型主要有三類：單酯型二萜類生物堿、雙酯型二萜類生物堿、脂型生物堿。現代藥理學研究證明，單酯型和雙酯型二萜生物堿雖生物活性較強，但毒性也較大。脂型生物堿具有鎮痛、消炎等顯著的生物活性，與單酯型和雙酯型生物堿比較，其毒性較小，是一類具有廣泛藥理活性的化學成分，具有重要的研究價值和廣闊的應用前景。近幾十年來，人們對附子及烏頭屬植物中化學成分的分離提取主要集中在單酯型生物堿和雙酯型生物堿上，而對脂型生物堿的分離提取研究甚少。

目前，國內常采用酸水滲漉(李正幫等，天然產物研究與開發：Vol.9(1)，1997，9-14)提取附子及烏頭屬植物中的生物堿，國外也有報道用甲醇提取附子中生物堿(Katagawa，Chem.Pharm.Bull.30(2)758-761(1982))。但是由于脂型生物堿難溶于酸水，用酸水滲漉法提取的生物堿不全面，脂型生物堿的收率較低。而附子中生物堿在甲醇中容易分解，很難大量提取。用乙醇提取(丁立生等，天然產物研究與開發：Vol.6(3)，1994，50-54)附子中生物堿的效率雖然較高，但是其中含有淀粉、糖等雜質，需要進一步的分離提純。也有用柱色譜法分離純化生物堿，但柱色譜法存在由不可逆吸附導致產率低的缺點，況且分離過程十分耗時、耗力，不利于生物堿的大量分離提取。綜上所述，雖然對附子及烏頭屬植物中各型生物堿的研究十分迫切，但是由于分離提取困難，研究進展十分緩慢。

發明內容

本發明的目的是提供一種從烏頭屬中藥材中分離提取單雙酯型生物堿與脂型生物堿的方法。

將烏頭屬中藥材的干燥粉末浸于體積百分比濃度為95％的乙醇中超聲提取2～3小時，在室溫(20～25℃)冷浸48～72小時，乙醇與藥材粉末的重量比為5∶1，濾出乙醇提取液，把浸過的藥渣按上述方法再處理三次，合并四次濾出的乙醇提取液，在50℃下減壓蒸出溶劑，得粗浸膏；將粗浸膏用10～12倍體積的無水乙醇溶解，過濾除去不溶物，靜置，醇沉，離心后得濾液，50℃下減壓蒸出乙醇得浸膏；用環己烷∶乙醇∶水的體積比為2∶1∶1的己烷-乙醇-水的體系進行萃取，取上層液于50℃下減壓蒸干溶劑，得到純凈的脂型生物堿；取下層液于50℃下減壓蒸干溶劑，得到純凈的單酯型和雙酯型生物堿；如果下層液中還含有脂型生物堿，則于50℃減壓蒸干溶劑得浸膏后，繼續用上述的環己烷-乙醇-水體系重復萃取，直至下層液中不含脂型生物堿；所述的烏頭屬植物為：附子、川烏、川烏的炮制品黑順片、草烏或雪上一支蒿。

本發明的有益效果：通過電噴霧質譜檢測，上層液中只含脂型生物堿，不含單酯型和雙酯型生物堿，脂型生物堿的產率在0.34％以上；下層液中只含單酯型和雙酯型生物堿，不含脂型生物堿，單酯型和雙酯型生物堿的總產率在1.02％以上。本發明的方法能從頭屬中藥材中分離提取各型生物堿，并能對其進行純化，方法簡便快速。

附圖說明

附圖1為本發明的包含所有生物堿的乙醇提取液電噴霧質譜圖。由圖可以看出乙醇提取的生物堿成分較多，包含所有類型的生物堿，說明乙醇提取能力較強；

附圖2為本發明的萃取后的下層液中單酯型和雙酯型生物堿的質譜圖，其中不含有脂型生物堿；

附圖3為本發明的萃取后的上層液中脂型生物堿的質譜圖，其中不含有單酯型和雙酯型生物堿。

附圖2和附圖3說明分離比較完全，效率高。

具體實施方式

實施例1：