[發明專利]樹莓果實中超氧化物歧化酶的提取方法

無效

• 申請號: 200710055624.3
• 申請日: 2007-05-14
• 公開（公告）號: CN101307308A
• 公開（公告）日: 2008-11-19
• 發明（設計）人: 關士林;陳衛民;胡文學;鄭德隆;楊世升;石文淵;方中琴;劉景芬;家賢茹
• 申請（專利權）人: 關士林;陳衛民;胡文學;鄭德隆;楊世升;石文淵;方中琴;劉景芬;家賢茹
• 主分類號: C12N9/08
• 分類號: C12N9/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1、一種從樹莓果實提取過氧化物歧化酶的方法，其特征在于：將過氧化物歧化酶(以下簡稱SOD)從樹莓果實中提取出來涉及四個分離過程：

(1)SOD與固性物分離：通機械磨細方法使SOD從線粒體進入果汁中，然后通過離心分離等分離過程，將含有SOD的果汁與樹莓果實的固性物分離得到SOD果汁。它可以用于進一步提取SOD，也可以制成“食品級樹莓SOD高檔果汁”。

(2)SOD與小分子及離子分離：通過膜分離法或凝膠過濾色譜法將小分子及離子與SOD分離，得到兩種產物：一種產物是含有分子量超過一萬的大分子物質，它們是SOD和蛋白質的水溶液，可用于進一步提取SOD；一種產物是含有小分子及離子的水溶液，它含有極為豐富的防癌、防衰老、防心腦血管疾病的營養物質，經分裝后得到“樹莓果精華液”產品。

(3)SOD與蛋白質分離：通過膜分離或凝膠過濾色譜分離將蛋白質與SOD分離，得到非常純凈SOD水溶液，其純度達到藥品級要求，沒有細菌，沒有雜質。該SOD水溶液經濃縮達到SOD針劑所需濃度的SOD濃縮液，該濃縮液可以用于制“藥品級SOD針劑”，也可用于制“藥品級SOD粉劑”或“藥品級SOD片劑”。

(4)SOD與水分離：通過濃縮及冷凍真空干燥等工藝過程，將SOD濃縮液中的SOD與水分離，得到“藥品級SOD粉劑”或“藥品級SOD片劑”。

2、根據權利要求1所述的SOD與固性物的分離，其特征在于：

(1)采用了說明書附圖中圖1所示的工藝流程，該工藝流程是本發明首先提出的從樹莓果實中提取SOD果汁的工藝流程。

(2)在加工工藝過程中，全程防止SOD被氧化。其特征是：在粉碎、磨細、均化、離心分離、灌裝等分離過程中均采用氮氣保護，防止SOD與氧氣接觸而氧化。在還原劑配料工序加入異抗壞血酸鈉，其用量范圍是0.001-0.1％。

3、根據權利要求1所述的將SOD與小分子物質及離子的分離、SOD與蛋白質的分離可用膜分離方法，其特征在于：

(1)采用了說明書附圖中圖2所示的工藝流程，實施例2說明了該工藝流程。其特征：該工藝流程是本發明首先提出的，通過膜分離法從樹莓SOD果汁中提取SOD濃縮液的工藝流程。

(2)該膜分離法的特征在于：將微濾、超濾與納濾技術聯合使用。微濾膜孔徑為0.1μm，除掉1μm以上的顆粒及病菌。超濾選用截出分子量大于5萬的超濾膜，濾液只含有SOD及小分子、離子。納濾選用截取分子量大于2000的納濾膜，濾液為小分子營養物，可制“樹莓果精華液”。濾餅為SOD。該濾餅SOD可冷凍干燥制成“藥品級SOD粉劑”或“藥品級SOD片劑”，也可配制成“藥品級SOD針劑”。

4、根據權利要求1所述的將SOD與小分子物質及離子的分離，SOD與蛋白質分離可用凝膠過濾色譜分離法，其特征在于：

(1)采用了說明書附圖中圖3所示的工藝流程，實施例3說明了該流程，其特征在于：該工程流程是本發明首先提出的，通過制備型凝膠過濾色譜分離法從樹莓SOD果汁中提取SOD濃縮的工藝流程。

(2)該制備型凝膠過濾色譜分離法的特征在于：

①將樹莓SOD果汁制成SOD果汁GFC工作液。

②采用制備型分族凝膠過濾色譜裝置：L/D范圍在5∶1-10∶1，實例3采用L/D＝6∶1，Vt＝589cm³，凝膠為SephadexG-25，G50。進料樣品量為100cm³。

③截取分子量小于10000濾液制“樹莓果精華液”。

④截取分子量大于10000濾液用于分離SOD。

⑤采用制備型分級凝膠過濾色譜裝置：L/D范圍在20∶11-00∶1，實例3采用L/D＝22.5，Vt＝1130cm³，凝膠為SephadexG100。進料試樣量為33cm³，流速5-10cm/h，實施例3采用8cm/h。

⑥根據樹莓SOD的峰洗提體積Ve截取SOD組份，得到純SOD水溶液。利用該純SOD水溶液可制得“藥品級SOD針劑”，也可干燥后制得“藥品級SOD粉劑”或“藥品級SOD片劑”。