[發(fā)明專利]一種花生蛋白活性多肽及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710054647.2
• 申請(qǐng)日: 2007-06-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101113168A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張吉秀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 張吉秀
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C07K1/14
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種生物活性多肽及其制備方法，尤其是涉及一種花生蛋白活性多肽的連續(xù)發(fā)酵酶解合成工藝及制備方法。

技術(shù)背景：

花生在我國(guó)是主要的油料作物之一，而榨油后的花生餅粕大部分用于加工飼料。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和花生蛋白開(kāi)發(fā)利用技術(shù)的成熟，具有良好功能性質(zhì)和生理活性的花生蛋白深加工產(chǎn)品正在蓬勃興起，傳統(tǒng)制備生物活性肽的方法有天然提取法、化學(xué)合成法、酸堿法及基因工程法，但這些方法的弊端是：肽得率低，生產(chǎn)成本高及產(chǎn)生副反應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種采用連續(xù)發(fā)酵酶解合成法制備花生蛋白活性多肽及其制備方法。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種花生蛋白活性多肽，所述的活性多肽占總蛋白質(zhì)≥90，蛋白活性多肽占總蛋白質(zhì)≥80％，脂肪≤1％，水份≤6％，灰份≤2％。

所述的花生蛋白活性多肽，按如下步驟制備：

(1)、原料處理：將花生蛋白粉水溶解，以堿調(diào)節(jié)PH值至堿性，離心取上清；以酸沉淀上清，離心收集沉淀。

(2)、酶解：將沉淀物加水溶解，再加入復(fù)合蛋白酶進(jìn)行酶解，溫度控制在30～40℃，反應(yīng)時(shí)間為3～4h，PH值掌握在8～9，復(fù)合蛋白酶用量為1～3‰/g蛋白。

(3)、酶滅活分離：將酶處理后的蛋白溶液快速升溫80～85℃。保持3～5秒鐘使酶滅活，用分離機(jī)分離得上清液。

(4)、發(fā)酵酶解：將分離后的蛋白物加不含氨的蒸餾水溶解，加入復(fù)合蛋白酶進(jìn)行發(fā)酵酶解，溫度控制在32～55℃，反應(yīng)時(shí)間為8～12h，使PH值為7～8，復(fù)合蛋白酶用量為3～5‰/g蛋白。

(5)、分離脫鹽脫苦：采用多功能膜分離機(jī)，在分離的過(guò)程中將鹽和苦味脫掉并將濾渣除去。

(6)、濃縮、干燥：將分子量為500～3000Da的花生蛋白活性多肽溶液再繼續(xù)通過(guò)H+型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和OH-型陰離子交換樹(shù)脂，經(jīng)濃縮、干燥得到花生蛋白活性多肽。

所述的制備方法，步驟(1)中，將花生餅粕超微粉碎至150～350目。

所述的制備方法，步驟(1)中，花生蛋白粉與水的比例為1∶5～15，以堿液調(diào)節(jié)上清液PH值至堿性時(shí)PH值為8～9，以酸液調(diào)節(jié)上清液PH值至酸性時(shí)PH值為5～6。

所述的制備方法，步驟(3)中，將滅酶后的蛋白上清溶液的PH值調(diào)至堿性進(jìn)行攪拌分離花生蛋白；加酸沉淀蛋白，離心收集溶液。

所述的制備方法，步驟(4)中，將離心分離后的花生蛋白加水稀釋調(diào)節(jié)PH值呈堿性，加入復(fù)合蛋白酶B進(jìn)行酶解。

所述的制備方法，步驟(5、6)中，將花生蛋白活性多肽溶液通過(guò)多功能膜分離設(shè)備過(guò)濾、脫鹽，脫鹽后的多肽溶液經(jīng)濃縮、干燥得到花生蛋白活性多肽產(chǎn)品。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明以花生蛋白為原料，通過(guò)連續(xù)發(fā)酵酶解合成工藝，制備出花生蛋白活性多肽，其與粉狀蛋白相比具有良好的溶解性和穩(wěn)定性，例如粉狀花生蛋白隨濃度的增加粘度迅速提高，而花生蛋白活性多肽在高濃度下仍保持一定的流動(dòng)性；在溶解性方面，粉狀花生蛋白隨著溫度升高及PH值的降低易形成沉淀，而花生蛋白活性多肽仍保持良好的溶解性。

本發(fā)明的發(fā)明人通過(guò)實(shí)驗(yàn)室證明，花生蛋白活性多肽具有多種生物活性。

具體實(shí)施方式：

實(shí)施例1：花生蛋白活性多肽的制備工藝過(guò)程：

花生→低溫取油→毛油精煉→成品油

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??????花生豆粕→超微粉碎→半脫脂蛋白粉→酶解→分離→發(fā)酵酶解→分離→超濾→脫鹽→濃縮→干燥→花生蛋白活性多肽(成品)。具體制備過(guò)程是：

1、原料預(yù)處理：花生餅粕超級(jí)粉碎，加水稀釋，過(guò)150～350目篩制成粉花生蛋白，用堿調(diào)節(jié)PH值至微堿性并調(diào)節(jié)溶液溫度至酶反應(yīng)最適溫度，而后加入復(fù)合酶A進(jìn)行反應(yīng)，再對(duì)花生蛋白粉作進(jìn)一步提純：

(1)花生蛋白粉→水溶(1∶15為粉水重量比)→堿提(用堿調(diào)節(jié)使PH＝7.5～9，25℃，25min)，溫度控制在30～40℃，反應(yīng)時(shí)間為3。5h，復(fù)合酶A的用量為1～3‰/g蛋白→離心(3000g、5min)取上層清液→酸沉(以鹽酸調(diào)節(jié)使PH＝4.5～5)→離心(5000g、10min)收集沉淀。