[發(fā)明專利]一種人工細(xì)胞酶及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710049076.3
• 申請日: 2007-05-11
• 公開（公告）號: CN101301474A
• 公開（公告）日: 2008-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李幫經(jīng);張晟;王瑞;丁立生;彭樹林
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院成都生物研究所
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K47/36;A61K38/47;A61K38/44;A61K38/43;A61K38/00;A61K35/00;C12N9/00
• 代理公司: 成都賽恩斯專利代理事務(wù)所
• 代理人: 彭曉波

1.一種人工細(xì)胞酶，其特征是：用分子量為10,000至5,000,000的水溶性高分子材料或/和無機(jī)離子作為細(xì)胞膜，膜內(nèi)包裹酶或蛋白質(zhì)藥物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工細(xì)胞酶，其特征是：所述的酶或蛋白質(zhì)藥物的分子量大于其可以代謝的毒素小分子和代謝產(chǎn)物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工細(xì)胞酶，其特征是：采用的水溶性高分子材料為天然高分子，如魔芋葡甘聚糖、殼聚糖和海藻酸鈉等；或/和合成高分子，如聚氨基酸、聚乙二醇-聚賴氨酸等；或/和半合成高分子，如交聯(lián)殼聚糖、羧甲基化殼聚糖、魔芋葡甘聚糖-丙烯酸酯等；它們中的一種或兩種以上的混合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工細(xì)胞酶，其特征是：采用的酶為蛋白類酶如天冬酰胺酶、酪氨酸酶、胃蛋白酶、氨基酸氧化酶、谷胱甘肽合成酶、超氧化歧化酶等，或核酸類酶如分子內(nèi)催化的自我剪切酶、自我剪接酶，或分子間催化的RNA剪切酶、多功能R-酶等。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工細(xì)胞酶，其特征是：所述的細(xì)胞膜，其半透過性通過調(diào)節(jié)膜材的分子量、濃度、包裹層數(shù)以及組分來調(diào)節(jié)；細(xì)胞膜的孔徑控制在毒素小分子及其代謝產(chǎn)物小分子可以通過而所包裹的酶或蛋白質(zhì)藥物及人體內(nèi)免疫細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和抗體不能通過。

6.權(quán)利要求1所述人工細(xì)胞酶的制備方法，其特征是：包括以下操作步驟：

1)將酶或蛋白質(zhì)藥物和帶有正離子電荷的水溶性高分子材料或/和無機(jī)離子溶解于水或緩沖溶液中，記為溶液A；將具有相反電荷的另一水溶性高分子材料或/和無機(jī)離子溶解于水或緩沖溶液中，記為溶液B；酶或蛋白質(zhì)藥物在溶劑中的重量百分?jǐn)?shù)為0.0001％-30％；高分子材料在溶劑中的重量百分?jǐn)?shù)為0.0001％-50％；無機(jī)離子的重量百分?jǐn)?shù)為0.0001％-80％；

2)操作條件為所用酶的適宜pH值和溫度；

3)在攪拌或超聲的條件下將溶液A滴入溶液B中或?qū)⑷芤築滴入溶液A中，生成淡藍(lán)色至乳白色的混濁溶液；

4)將生成的混濁溶液離心分離，得到含酶的人工細(xì)胞和清液，離心轉(zhuǎn)速為10,000-100,000r.p.m./min；

5)用標(biāo)準(zhǔn)方法測定清液中酶的含量，由此得到酶在人工細(xì)胞中的包裹率。

7.權(quán)利要求6所述人工細(xì)胞酶的制備方法，其特征是：酶或蛋白質(zhì)藥物在溶劑中的重量百分?jǐn)?shù)為0.001％-10％，高分子材料在溶劑中的重量百分?jǐn)?shù)為0.001％-30％，無機(jī)離子的重量百分?jǐn)?shù)為0.001％-50％。