[發明專利]一種用化學改性氧化鋅納米棒陣列薄膜識別血清蛋白的方法

無效

• 申請號: 200710048374.0
• 申請日: 2007-02-01
• 公開（公告）號: CN101236208A
• 公開（公告）日: 2008-08-06
• 發明（設計）人: 黃忠兵;尹光福;姚亞東;廖曉明;康云清
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明是關于熒光檢測識別血清蛋白的方法，尤其是采用化學改性ZnO納米棒陣列薄膜來識別血清蛋白的方法。

背景技術

氧化鋅(ZnO)是氧化鋅作為一種重要的半導體和壓電納米材料，帶隙寬度和激子結合能分別為3.37eV和60meV，在室溫下可以獲得高效的激子發光，其在真空熒光顯示、電致發光、低壓場發射顯示、激光、光電子器件、傳感器以及能量轉換器等方面具有廣泛的應用前景。與其他半導體納米材料相比，納米氧化鋅具有異常豐富的特殊形貌，如：花狀、環狀、帶狀、四針狀、片裝、塔狀、籠狀及螺旋槳狀等。這些豐富的特殊形貌可能使其具有一些新的性能并有望在納米器件及微電子設備等方面發揮重要作用，被認為是僅次于碳納米管之后最重要的納米結構材料。

由于具有快速高效、大批量、高靈敏度、專一性等特點，生物分子的熒光性被廣泛使用在蛋白質成分和功能等許多分析中，如酶連接免疫吸收劑檢測、熒光膠體染色和蛋白質檢測，以及基因測序、蛋白質組學、新藥開發和疾病診斷等。在這些熒光生物檢測中，提高檢測靈敏性、增加信噪比是當前所面臨的最大的挑戰。為提高熒光檢測性能和分辨率，人們開發了先進的基底材料。一批新的、能夠阻止熒光分子淬滅性的有機、無機以及復合材料被開發出來，它們能夠在單激發光源下產生多重熒光效應。開發新型熒光檢測技術是當前納米科學對生物分子熒光檢測領域最大的貢獻之一。納米ZnO具有激發波長寬、發射波譜窄、發光強度高、無光漂白等特點，因而在檢測中具有反應迅速和靈敏性好的特點。ZnO納米線的寬帶隙特性還少有在生物傳感器中應用。更重要的是，采用ZnO納米棒陣列薄膜，可以與蛋白等生物分子牢固連接，使這種薄膜更具有廣泛的實用意義，可用于生物信息檢測及疾病診斷分析中。

發明內容

本發明的目的是為了使組成陣列薄膜的ZnO納米棒表面能夠識別血清蛋白，將蛋白接枝修飾在納米棒表面、形成蛋白的生物陣列在用熒光分光光度計進行檢測。首次提出了用ZnO納米棒陣列薄膜為檢測基底進行檢測識別血清蛋白的方法。

1.本發明的用化學改性ZnO納米棒陣列薄膜識別血清蛋白的方法，依次包括如下步驟：

(1)將化學改性的ZnO陣列薄膜放入多肽縮合劑的磷酸鹽緩沖溶液中低溫輕搖浸泡一定時間；

(2)將基底材料取出并用磷酸鹽緩沖溶液清洗五次后，放進血清蛋白的磷酸鹽緩沖溶液中低溫輕搖浸泡一定時間；

(3)再次將基底材料取出并用磷酸鹽緩沖溶液清洗五次后，用暖風吹干，得到血清蛋白接枝ZnO納米棒陣列薄膜；

(4)用熒光分光光度計分析這種生物陣列薄膜，通過激發光強度識別血清蛋白。

本發明的有益效果是，在化學改性ZnO納米棒陣列薄膜上接枝形成了血清蛋白生物陣列，這種生物陣列能增強ZnO光致發光強度；根據不同蛋白發光強度的差別而識別檢測血清蛋白。實現了ZnO納米棒陣列薄膜在生物信息檢測上的應用，具有很大的實用意義。

附圖說明

圖1：接枝上牛血清蛋白實施例1#的掃描電鏡照片。

具體實施方式

下面結合實施例及對比實施例對本發明作詳細闡述，但并不因此將本發明限制在所述的實施例范圍之內。

將化學改性的ZnO陣列薄膜放進0.08M的EDC的磷酸鹽緩沖溶液(pH為8.0)中并于8℃下輕搖浸泡48h；

將基底材料取出并用磷酸鹽緩沖溶液清洗五次后，放進0.08mg/mL的牛血清蛋白的磷酸鹽緩沖溶液(pH為8.0)中并于8℃下輕搖浸泡48h；

再次將基底材料取出并用磷酸鹽緩沖溶液清洗五次后，用暖風吹干，得到血清蛋白接枝ZnO納米棒陣列薄膜；

用熒光分光光度計分析這種生物陣列薄膜，通過激發光強度識別血清蛋白。

本發明與現有的熒光檢測技術相比較，主要區別在于ZnO納米棒陣列薄膜作為檢測基底具有激發波長寬、發射波譜窄、發光強度高、無光漂白等特點，因而在檢測中具有反應迅速和靈敏性好的特點。本發明具體實施及對比實施例詳見表1。