[發明專利]酶抑制劑及其制法和用途

無效

• 申請號: 200710046617.7
• 申請日: 2007-09-29
• 公開（公告）號: CN101397331A
• 公開（公告）日: 2009-04-01
• 發明（設計）人: 戚正武;韓錦鉑;王蘇明
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K38/55;A61K38/08;A61P31/18
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 徐 迅

技術領域

本發明涉及生物學或藥學領域；更具體的，本發明涉及一種新的Furin酶抑制劑。

背景技術

艾滋病全稱為獲得性免疫缺陷綜合征(Acquired?ImmunoDeficiencySyndrome，AIDS)，該病由人免疫缺陷病毒(Human?Immunodeficiency?Virus，HIV，艾滋病病毒)感染所引起，可導致被感染者免疫功能的部份或完全喪失，CD4⁺細胞數目減少，繼而發生隨機性感染、腫瘤等，其臨床表癥多種多樣。該疾病傳播速度快、死亡率高，且目前無法治愈，引起了各國政府和社會的高度關注。

HIV的感染是由病毒外膜前體蛋白gp160的加工開始的，gp160經過前體加工酶(例如Furin酶)加工后變為兩個片段：表面糖蛋白(surfaceglycoprotein，SU)gp120和跨膜蛋白(transmembrane?protein，TM)gp41。HIV-1首先通過gp120與靶細胞上的受體CD4結合，使得gp120的構象發生改變，并繼而與靶細胞上的輔受體CXCR4或CCR5結合，導致gp41的構象改變，暴露出其融合肽并插入到宿主細胞膜，從而啟動病毒膜與細胞膜的融合，完成病毒進入宿主細胞的感染過程。

gp160前體的加工是入侵過程的第一步，若能抑制此步就可阻止病毒的入侵，因而是重要的藥物作用靶點。gp160的加工主要是依賴宿主細胞中前體加工酶Furin的作用。在Thomas?Gary等人的專利(Gary?Thomas?et?al，UnitedStates?Patent：5604201，February?18，1997)中指出，Furin對切割位點的要求是必需含有RXXR的序列(P₁和P₄位點為Arg，而P₂和P₃位點則為任意氨基酸)，而近年來的研究表明HIV-1外膜糖蛋白gp160中就含有這樣的切割位點：Arg508-Glu-Lys-Arg511，證明了Furin對HIV-1病毒中外殼糖蛋白加工的重要意義，進一步提示，抑制Furin酶的作用就能抑制HIV-1病毒入侵人體宿主細胞。

目前針對Furin酶抑制劑的研究主要有兩種：化學計量的不可逆多肽抑制劑(癸?；?Arg-Val-Lys-Arg-CH₂Cl)和大蛋白的α?1-抗胰蛋白酶Portland(α?1-PDX，由394個氨基酸殘基組成)。前者由于毒性大而限制了其應用。α?1-PDX是通過對α?1抗胰蛋白酶的反應活性位點進行點突變，使其包含最小的Furin切割位點-Arg-Ile-Pro-Arg-。在體外試驗中α?1-PDX對Furin具有高選擇性，但當抑制劑濃度提高時也將抑制其它的蛋白前體加工酶。在細胞和動物研究當中，α?1-PDX是有效的Furin酶抑制劑，但它的分子量很大，基因工程表達困難，成本過高，不切合實際應用。此外，僅具有Furin切割位點Arg-Ile-Pro-Arg結構的小肽作為Furin酶抑制劑則具有不穩定的缺陷，無法實際應用。

在以往的研究中，本發明人以綠豆胰蛋白酶抑制劑片斷為支架，設計了一條具有21個氨基酸的多肽，該多肽的氨基酸序列如下：

該多肽的分子量較小，具有較為理想的Furin酶抑制活性。然而，由于存在兩個二硫鍵結構，因此該多肽在空間結構上具有一定的折疊形式，且二硫鍵之間極易于發生錯配，造成該多肽發生折疊錯誤，因此該多肽的合成條件復雜，可控性差，穩定性也不夠理想，這在實際的生產應用(特別是規?；a)上具有一定的限制。

因此，本領域迫切需要尋找一種分子更小、更易于合成、穩定性良好、活性高且無毒性的多肽Furin酶抑制劑，從而將之開發成為有效的抗HIV-1的新型藥物。

發明內容

本發明的目的在于提供一種合成方便、分子量小且活性高的Furin酶多肽抑制劑。

本發明的另一目在于是提供所述Furin酶多肽抑制劑的用途，以及含有該Furin酶多肽抑制劑的組合物。

在本發明第一方面，提供一種多肽，所述的多肽具有式(I)所示的氨基酸序列：