[發(fā)明專利]化學(xué)發(fā)光物質(zhì)吖啶酯DMAE·NHS的合成方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710045926.2
• 申請(qǐng)日: 2007-09-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101121710A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹東光;吳明紅;賀佑豐;劉一兵;沈德存;韓世泉;羅志福;焦正
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D401/12
• 分類號(hào): C07D401/12;C09K11/06
• 代理公司: 上海上大專利事務(wù)所
• 代理人: 何文欣

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種化學(xué)發(fā)光物質(zhì)吖啶酯DMAE·NHS的合成方法。

背景技術(shù)

化學(xué)發(fā)光分析法由于其高檢測(cè)靈敏度、儀器設(shè)備相對(duì)簡(jiǎn)單、易自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)、生物、醫(yī)學(xué)及環(huán)境等領(lǐng)域。目前，已有多種商品化的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)及化學(xué)發(fā)光體系，相對(duì)其它類的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，吖啶酯的發(fā)光效率高，發(fā)光體系簡(jiǎn)單，不需要催化劑和增強(qiáng)劑，自然本底低，標(biāo)記簡(jiǎn)單，分析靈敏度高。Weeks于1983年首次合成了用于化學(xué)發(fā)光分析的吖啶酯AE·NHS[4-(2-Succinimidyloxycarbonylethyl)phenyl-10methylacridinium-9-carboxylatefluorosulfonate]，4-(2-琥珀酰亞胺氧羰基乙基)苯基-10-甲基-吖啶-9-羧酸酯氟磺酸鹽。AE·NHS做為一種典型的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，具有良好的發(fā)光性能，已廣泛應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光分析，但其缺點(diǎn)是熱穩(wěn)定性不是很好，在水溶液中比較容易水解。一種新的吖啶酯衍生物DMAE·NHS[2’，6’-Dimethyl-4’-(N-Succinimidyloxycarbonyl)Phenyl-10-Methyl-Acridinium-9-Carboxylate?Methosulfate]，2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亞胺氧羰基)苯基-10-甲基-吖啶-9-羧酸酯甲磺酸鹽。相對(duì)于AE·NHS，該化合物的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在酚環(huán)上引入兩個(gè)甲基，其能起到增大空間位阻，增加該化合物在水溶液中的水解穩(wěn)定性的作用，DMAE·NHS的光量子產(chǎn)率與AE·NHS相當(dāng)，但其熱穩(wěn)定性較AE·NHS顯著提高，信噪比也比AE·NHS高。

但根據(jù)文獻(xiàn)中提供的方法，我們無(wú)法完成該化合物的制備。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于提供一種化學(xué)發(fā)光物質(zhì)吖啶酯DMAE·NHS的合成方法。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明方法采用了的反應(yīng)機(jī)理為：

根據(jù)上述反應(yīng)機(jī)理，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種化學(xué)發(fā)光物質(zhì)吖啶酯DMAE·NHS的合成方法，其特征在于該方法具有如下步驟：

a)3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸鉀的合成：將3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸溶于甲醇中，攪拌下，滴加KOH溶液以調(diào)節(jié)溶液pH為7，在室溫下攪拌反應(yīng)3±0.5小時(shí)，減壓蒸餾除去溶劑，加入丙酮研磨，過(guò)濾并用丙酮洗滌，真空干燥后得白色固體即為3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸鉀；

b)3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸芐酯的合成：將步驟a制備的3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸鉀、二苯并-18-冠醚-6溶于DMF和乙腈按1∶2體積比的混合溶劑中，攪拌下回流反應(yīng)30±5分鐘，再加入芐氯，繼續(xù)反應(yīng)3.5±0.5小時(shí)，冷卻至室溫，過(guò)濾，減壓蒸餾除去溶劑，用少量氯仿溶解提取，將提取液上硅膠柱進(jìn)行柱層析純化，首先用體積比為3∶1的氯仿與己烷的混合液淋洗，然后用氯仿淋洗，分部接收，分別點(diǎn)樣于硅膠板上進(jìn)行薄板層析，展開(kāi)劑為體積比為4∶1的甲苯與乙酸乙酯的混合液，收集對(duì)應(yīng)Rf＝0.6的部分，蒸發(fā)、干燥后得白色固體，即為3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸芐酯；其中3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸鹽、二苯并-18-冠醚-6與芐氯的摩爾比為：8.00～9.00∶1∶12.00～13.00；

c)9-吖啶酰氯的合成：將9-吖啶羧酸溶于亞硫酰氯中，加熱到100±5℃，攪拌反應(yīng)2±0.5小時(shí)，冷卻至室溫，減壓蒸餾除去過(guò)剩的亞硫酰氯，真空干燥后得黃色固體，即為9-吖啶酰氯；

d)2’，6’-二甲基-4’-芐氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯的合成：將上述制備的3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸芐酯和4-二甲基氨基吡啶溶于吡啶中，100±5℃溫度下，加熱攪拌反應(yīng)30±5分鐘，冷卻至室溫，加入9-吖啶酰氯，100±5℃下攪拌反應(yīng)3±0.5小時(shí)，然后在室溫下攪拌反應(yīng)過(guò)夜，減壓蒸餾除去溶劑，粗產(chǎn)品用少量氯仿提取后上硅膠柱進(jìn)行柱層析純化，先用氯仿，后用乙酸乙酯淋洗，分部接收，點(diǎn)樣于硅膠板上進(jìn)行薄板層析，展開(kāi)劑為體積比為4∶1的甲苯與乙酸乙酯的混合液，收集Rf＝0.6部分，蒸發(fā)，真空干燥，再用乙酸乙酯和己烷進(jìn)行重結(jié)晶，真空干燥后得針狀黃色固體，即為2’，6’-二甲基-4’-芐氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯；其中反應(yīng)物3，5-二甲基-4-羥基苯甲酸芐酯、4-二甲基氨基吡啶與9-吖啶酰氯的摩爾比為6.00～7.00∶1∶8.00～9.00；