[發(fā)明專利]米曲霉高效制備EGCG水解酶及生產(chǎn)EGC和沒食子酸的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710044314.1 | 申請日： | 2007-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN101134941A | 公開（公告）日： | 2008-03-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 洪楓;鐘坤 | 申請（專利權(quán)）人： | 東華大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N9/14;C12P7/42;C12R1/69 |
| 代理公司： | 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 | 代理人： | 黃志達(dá);謝文凱 |
| 地址： | 201620上海市松*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 曲霉 高效 制備 egcg 水解 生產(chǎn) egc 沒食子酸 方法 | ||
1.一種高效誘導(dǎo)米曲霉制備EGCG水解酶的方法，包括下列步驟：
(1)將米曲霉種子培養(yǎng)基在25-30℃，100-250r/min條件下培養(yǎng)36小時；
(2)以4-10％接種量轉(zhuǎn)接至含EGCG的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在25-30℃，100-250r/min條件下培養(yǎng)48-120小時，過濾，離心得酶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種誘導(dǎo)制備EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的米曲霉是食品工業(yè)用安全菌種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種誘導(dǎo)制備EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的EGCG原料采用不同的純度。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種誘導(dǎo)制備EGCG水解酶方法，其特征在于：所述的培養(yǎng)產(chǎn)酶過程是間歇式的、分批補料式或連續(xù)培養(yǎng)式。
5.一種利用EGCG水解酶生產(chǎn)EGC和沒食子酸的方法，包括下列步驟：
(1)構(gòu)建EGCG酶水解反應(yīng)體系、酶液空白體系和底物空白體系；
(2)反應(yīng)體系和空白體系在25-60℃，反應(yīng)0-48小時或直至水解反應(yīng)結(jié)束才停止；
(3)利用高效液相色譜和薄層層析分析底物和產(chǎn)物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種利用EGCG水解酶生產(chǎn)EGC和沒食子酸的方法，其特征在于：所述的EGCG酶水解反應(yīng)體系是EGCG底物、EGCG水解酶和pH3-7緩沖液體系，酶液空白體系是EGCG水解酶和pH3-7緩沖液體系，底物空白體系是EGCG底物和pH3-7緩沖液體系。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種利用EGCG水解酶生產(chǎn)EGC和沒食子酸的方法，其特征在于：所述的EGCG底物采用不同的純度。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種利用EGCG水解酶生產(chǎn)EGC和沒食子酸的方法，其特征在于：所述的薄層層析分析是正相硅膠板分析或反相硅膠板分析。
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